指將微生物接種到培養(yǎng)基內(nèi),經(jīng)一定條件使微生物生長(zhǎng)繁殖。
接種的方法有 6種。①涂布法:將純菌或含菌材料均勻地涂布在固體培養(yǎng)基表面。
②劃線法:用接種環(huán)沾取含菌材料,在固體培養(yǎng)基表面劃線。③傾注法:取少許含菌材料放入無(wú)菌培養(yǎng)皿中,然后傾入已融化并已冷卻至48℃左右的瓊脂滅菌培養(yǎng)基,搖勻后冷卻凝固。
④點(diǎn)植法:用接種針在固體培養(yǎng)基表面接觸幾點(diǎn)。⑤穿刺法:用接種針沾取的微生物經(jīng)穿刺而進(jìn)入半固體深層培養(yǎng)基中。
⑥浸洗法:用接種針挑取含菌材料,在液體培養(yǎng)基中洗下。培養(yǎng)方法則根據(jù)微生物對(duì)氧的要求情況分為需氧和厭氧兩種。
需氧培養(yǎng)是指必須在有氧環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng),必要時(shí)用振蕩或通氣攪拌達(dá)到充分供氧;厭氧培養(yǎng)是培養(yǎng)過(guò)程一直保持在少氧或無(wú)氧的環(huán)境中。厭氧的方法可用物理、化學(xué)、生物等辦法使培養(yǎng)容器內(nèi)的氧氣部分或全部消除。
通常用抽真空方法,有時(shí)將兩種方法結(jié)合使用,使厭氧培養(yǎng)更為理想。接種、培養(yǎng)是食品微生物應(yīng)用、研究過(guò)程中最基本和必不可少的方法。
高中生物涉及到的微生物及代謝類型
乳酸菌、硝化細(xì)菌(代謝類型,其中乳酸菌是厭氧微生物);
肺炎雙球菌S型、R型(遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ));
結(jié)核桿菌和 麻風(fēng)桿菌(胞內(nèi)寄生菌);
根瘤菌、圓褐固氮菌(固氮菌);
大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌(為基因工程提供運(yùn)載體,也可作為基因工程的受體細(xì)胞,其中大腸桿菌是厭氧微生物);
蘇云金芽孢 桿菌(為抗蟲棉提供抗蟲基因);
假單孢桿菌 (分解石油的超級(jí)細(xì)菌);
甲基營(yíng)養(yǎng)細(xì) 菌、谷氨酸棒狀桿菌、黃色短桿菌(微生物的代謝);
鏈球菌(一 般厭氧型);
產(chǎn)甲烷桿菌 (嚴(yán)格厭氧型)等
1905年,德國(guó)微生物學(xué)家科赫因?qū)Y(jié)核桿菌和結(jié)核菌素的研究取得重大成就而榮獲諾貝爾獎(jiǎng)金。
他發(fā)明固體培養(yǎng)基,用它分離培養(yǎng)細(xì)菌,創(chuàng)造細(xì)菌的純粹培養(yǎng)法。他又改進(jìn)細(xì)菌染色法,為研究細(xì)菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu)創(chuàng)造有利條件。
荷蘭科學(xué)家E.C.翰遜教授研究使啤酒發(fā)酵的酵母,創(chuàng)造單細(xì)胞的純粹培養(yǎng)法。以后,又有人采用純粹培養(yǎng)法選擇適當(dāng)酵母,用于啤酒的工業(yè)生產(chǎn),為純粹培養(yǎng)法在工業(yè)發(fā)酵上的應(yīng)用開(kāi)辟了道路。
翰遜的學(xué)生哈斯發(fā)現(xiàn),當(dāng)時(shí)用的由明膠制成的固體培養(yǎng)基很容易發(fā)生液化現(xiàn)象,使用時(shí)有困難。哈斯的妻子建議用瓊脂代替明膠,獲得了較好的效果。
這種瓊脂培養(yǎng)基被后人采用,一直沿用到今天。后來(lái)又有人創(chuàng)造一種培養(yǎng)皿,可供微生物平板分離用。
從此以后,分離出的微生物日益增多,新的微生物不斷被發(fā)現(xiàn)。這樣,可供工業(yè)用的微生物也日益充實(shí)起來(lái),一支微生物生力軍異軍突起。
我只知道有關(guān)厭氧菌的一些東西:
厭氧菌尚無(wú)公認(rèn)的確切定義,但通常認(rèn)為這是一類只能在低氧分壓的條件下生長(zhǎng),而不能在空氣(18%氧氣)和(或)10%二氧化碳濃度下的固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的細(xì)菌。按其對(duì)氧的耐受程度的不同,可分為專性厭氧菌、微需氧厭氧菌和兼性厭氧菌。
厭氧菌種類:脆弱類桿菌群、產(chǎn)色素普雷活特和卟啉單胞菌、解脲類桿菌群、核梭桿菌、厭氧革蘭陰性桿菌、厭氧革蘭陰性球菌、厭氧革蘭陽(yáng)性球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、其他被狀芽胞桿菌、厭氧革蘭陽(yáng)性桿菌。
希望對(duì)你有幫助。
厭氧菌的培養(yǎng)方法
厭氧菌在有氧的情況下不能生長(zhǎng)。要培養(yǎng)厭氧菌,必須創(chuàng)造一個(gè)無(wú)氧的環(huán)境。通常用培養(yǎng)基中加入還原劑,或用物理、化學(xué)方法去除環(huán)境中的游離氧,以降低氧化還原電勢(shì)。如皰肉培養(yǎng)基、硫基乙酸鈉培養(yǎng)基,牛心腦浸液培養(yǎng)基等。常用的厭氧培養(yǎng)方法有許多,可根據(jù)實(shí)際情況選用。
1.厭氧缸法接種好標(biāo)本的平板或液體培養(yǎng)基試管,可放入?yún)捬醺變?nèi)培養(yǎng),厭氧缸是普通的干燥缸,用物理化學(xué)的方法使缸內(nèi)造成厭氧環(huán)境,從而將厭氧菌培養(yǎng)出來(lái)。
2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內(nèi)造成厭氧環(huán)境來(lái)培養(yǎng)厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內(nèi)裝氣體發(fā)生管(有硼氫化鈉的碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿)、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、干燥劑。放入已接種好的平板后,盡量擠出袋內(nèi)空氣,然后密封袋口。先折斷氣體發(fā)生管,后折斷美蘭指示劑管,命名袋內(nèi)在半小時(shí)內(nèi)造成無(wú)氣環(huán)境。如不突變表示袋內(nèi)已達(dá)厭氧狀態(tài),可以孵育。
3.厭氧手套箱(Anaerobie glove box)是迄今為止國(guó)際上公認(rèn)的培養(yǎng)厭氧菌最佳儀器之一。它是一個(gè)密閉的大型金屬箱,箱的前面有一個(gè)有機(jī)玻璃做的透明面板,板上裝有兩個(gè)手套,可通過(guò)手套在箱內(nèi)進(jìn)行操作,故名。箱側(cè)有一交換室,具有內(nèi)外二門,內(nèi)門通箱內(nèi)先關(guān)著。欲放物入箱,先打開(kāi)外門,放入交換室,關(guān)上外門進(jìn)行抽氣和換氣(H2,CO2,N2)達(dá)到厭氧狀態(tài),然后手伸入手套把交換室內(nèi)門打開(kāi),將物品移入箱內(nèi),關(guān)上內(nèi)門。箱內(nèi)保持厭氧狀態(tài),也是利用充氣中的氫在鈀的催化下和箱中錢殘余氧化合成水的原理。該箱可調(diào)節(jié)溫度,本身是孵箱或孵箱即附在其內(nèi),還可放入解剖顯微鏡便于觀察厭氧菌菌落,這種厭氧箱適于作厭氧細(xì)菌的大量培養(yǎng)研究,大量培養(yǎng)基可放入作預(yù)還原和厭氧性無(wú)菌試驗(yàn)。金屬硬壁型厭氧箱的抽氣、充氣、厭氧環(huán)境和溫度等均系自動(dòng)調(diào)節(jié)。
4.厭氧盒:原理同厭氧袋,有成品銷售。
5.生物耗氧法:在一密閉的容器內(nèi)放以生物(多是植物),消耗氧氣,同時(shí)產(chǎn)生二氧化碳,供細(xì)菌生長(zhǎng)用。我沒(méi)見(jiàn)過(guò)。
6.焦性末食子酸法:在一潔凈的玻片上鋪上紗布或?yàn)V紙,均勻撒上焦性末食子酸,然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液,迅速將已接種細(xì)菌的平板倒扣在上面,用融化的白蠟封邊,造成一個(gè)封閉空間。焦性末食子酸與堿反應(yīng)后耗氧。該法用于厭氧不嚴(yán)格的厭氧菌的培養(yǎng),簡(jiǎn)單。如有梭狀芽孢桿菌。
7.皰肉培養(yǎng)基:本身就是一個(gè)不需特殊設(shè)備的厭氧培養(yǎng)法。皰肉和肉湯裝入大試管,液面封凡士林,造成無(wú)氧環(huán)境。
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