動物細胞的方法特點是(培養(yǎng)條件下,動物細胞生理特點)
1.培養(yǎng)條件下,動物細胞有哪些生理特點
物細胞培養(yǎng)的應(yīng)用
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細胞培養(yǎng)是指細胞在體外條件下的生長，動物細胞在單獨細胞培養(yǎng)的過程中不再形成個體。
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概念
動物細胞培養(yǎng)（animalcellculture）就是從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細胞（使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶）然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。
簡介
1.動物細胞培養(yǎng)液的成分：體外細胞培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如，需要糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素等。將細胞所需的上述物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基，稱為合成培養(yǎng)基。由于動物細胞生活的內(nèi)環(huán)境還有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入動物血清以提供一個類似生物體內(nèi)的環(huán)境，因此在使用合成培養(yǎng)基時，通常需加入血清、血漿等一些天然成分。[1]
2.動物細胞培養(yǎng)液的特點：液體培養(yǎng)基、通常含動物血清。
3.動物細胞培養(yǎng)的條件：
①無菌、無毒的環(huán)境：對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理，通常還要在培養(yǎng)液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物防止細胞代謝產(chǎn)物累積對細胞自身產(chǎn)生危害。
②營養(yǎng)物質(zhì)：無機物（無機鹽、微量元素等），有機物（糖、氨基酸、促生長因等）
血清和血漿 但血清和血漿不是營養(yǎng)物質(zhì)。
③溫度和pH(36.5±0.5℃，7.2~7.4)
④氣體環(huán)境（95%的空氣+5%CO 2的混合氣體）
其中5%CO2氣體是為保持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定
3.基本過程
取動物胚胎或幼齡動物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個細胞，將處理后的細胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，成為細胞貼壁。當(dāng)貼壁細胞分裂生長到互相接觸時，細胞就會停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制。此時需要將出現(xiàn)接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細胞懸浮液。另外，原代培養(yǎng)就是從機體取出后立即進行的細胞、組織培養(yǎng)。當(dāng)細胞從動植物中生長遷移出來，形成生長暈并增大以后，科學(xué)家接著進行傳代培養(yǎng)，即將原代培養(yǎng)細胞分成若干份，接種到若干份培養(yǎng)基中，使其繼續(xù)生長、增殖。通過一定的選擇或純化方法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細胞稱為細胞株。當(dāng)培養(yǎng)超過50代時，大多數(shù)的細胞已經(jīng)衰老死亡，但仍有部分細胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變出現(xiàn)了無限傳代的特性，即癌變。此時的細胞被稱為細胞系。
2.動物細胞培養(yǎng)的特點
細胞培養(yǎng)方式大致可分為兩種：一種是群體培養(yǎng)（mass culture），將含有一定數(shù)量細胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中，讓細胞貼壁生長，匯合（confluence）后形成均勻的單細胞層；另一種是克隆培養(yǎng)（clonal culture），將高度稀釋的游離細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，各個細胞貼壁后，彼此距離較遠，經(jīng)過生長增殖每一個細胞形成一個細胞集落，稱為克隆（clone）。一個細胞克隆中的所有細胞均來源于同一個祖先細胞。此外，為了制取細胞產(chǎn)品而設(shè)計了轉(zhuǎn)鼓培養(yǎng)法，使用大容量的圓培養(yǎng)瓶，在培養(yǎng)過程中不斷地轉(zhuǎn)動，使培養(yǎng)的細胞始終處于懸浮狀態(tài)之中而不貼壁。
細胞系名稱
細胞類型
來源
3T3
成纖維細胞
小鼠
HeLa
宮頸癌上皮細胞
人
BHK21
成纖維細胞
敘利亞倉鼠
PtKl
上皮細胞
袋鼠
L6
成肌細胞
大鼠
PCI2
嗜鉻細胞
大鼠
SP2
漿細胞
小鼠
SP2/0
骨髓瘤漿細胞
小鼠
CHO
卵巢細胞
中國地鼠
