茚三酮手印(茚三酮顯色液容易氧化嗎)
1.茚三酮顯色液容易氧化嗎
1,pH值的影響。
樓主在實(shí)驗(yàn)中兩次用到緩沖液調(diào)節(jié)pH=5。5，但是在最后顯色的一步是在加熱的狀況下進(jìn)行的。
沒(méi)有在反應(yīng)過(guò)程中檢測(cè)pH值的變化，導(dǎo)致顏色不是Ruhemann紫。而茚三酮與氨基酸作用得到的藍(lán)紫色物質(zhì)是一種銨鹽。
從結(jié)構(gòu)上看，季銨和還原的酮的氧連在一起，這本來(lái)就是個(gè)亞穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。 季銨鹽容易把H+給O得到一個(gè)羥基，所以很依賴(lài)pH的變化。
那么你的溶液不停變化吸光度就能解釋了，是由于Ruhemann紫因pH不適不斷釋放NH3或NH4+的結(jié)果。這個(gè)情況一般是由于pH值過(guò)大引起的。
2，沒(méi)有反應(yīng)完全。在進(jìn)行樣品沉降時(shí)其實(shí)很有可能殘留了許多蛋白質(zhì)和多肽。
多肽和蛋白質(zhì)也能形成這個(gè)反應(yīng)，但是肽越大反應(yīng)就越不靈敏。所以有可能是第三產(chǎn)物，中間得到的醛可能會(huì)影響了這個(gè)反應(yīng)，可能會(huì)生成其他帶有顏色的副產(chǎn)物干擾紫色的呈現(xiàn)。
但是在逐漸反應(yīng)后，醛由于大基團(tuán)逐漸分解對(duì)反應(yīng)的影響越來(lái)越小，這個(gè)干擾也就變小了，實(shí)際的紫色濃度自然比原來(lái)要弱許多。 以上只是個(gè)人推測(cè)，沒(méi)有依據(jù)。
建議你用其它方法測(cè)定，比如用茚三酮作顯色劑的紙層析色譜，不僅可以計(jì)算總量，還可以初步估計(jì)氨基酸種數(shù)。
2.得了周?chē)窠?jīng)損傷應(yīng)該注意什么?
根據(jù)外傷史、臨床癥狀和檢查，判斷神經(jīng)損傷的部位、性質(zhì)和程度。
一、臨床檢查 1。傷部檢查 檢查有無(wú)傷口，如有傷口，應(yīng)檢查其范圍和深度、軟組織損傷情況以及有無(wú)感染。
查明槍彈傷或彈片傷的徑路，有無(wú)血管傷、骨折或脫臼等。如傷口已愈合，觀察瘢痕情況和有無(wú)動(dòng)脈瘤或動(dòng)靜脈瘺形成等。
2。肢體姿勢(shì) 觀察肢體有無(wú)畸形。
橈神經(jīng)傷有腕下垂；尺神經(jīng)傷有爪狀手，即第4、5指的掌指關(guān)節(jié)過(guò)伸，指間關(guān)節(jié)屈曲；正中神經(jīng)傷有猿手；腓總神經(jīng)傷有足下垂等。如時(shí)間過(guò)久，因?qū)辜∪馐テ胶猓砂l(fā)生關(guān)節(jié)攣縮等改變。
3。運(yùn)動(dòng)功能的檢查 根據(jù)肌肉癱瘓情況判斷神經(jīng)損傷及其程度，用六級(jí)法區(qū)分肌力。
0級(jí)——無(wú)肌肉收縮； 1級(jí)——肌肉稍有收縮； 2級(jí)——不對(duì)抗地心引力方向，能達(dá)到關(guān)節(jié)完全動(dòng)度； 3級(jí)——對(duì)抗地心引力方向，能達(dá)到關(guān)節(jié)完全動(dòng)度，但不能加任何阻力； 4級(jí)——對(duì)抗地心引力方向并加一定阻力，能達(dá)到關(guān)節(jié)完全動(dòng)度； 5級(jí)——正常。 周?chē)窠?jīng)損傷引起肌肉軟癱，失去張力，有進(jìn)行性肌肉萎縮。
依神經(jīng)損傷程度不同，肌力有上述區(qū)別，在神經(jīng)恢復(fù)過(guò)程中，肌萎縮逐漸消失，如堅(jiān)持鍛煉可有不斷進(jìn)步。 4。
感覺(jué)功能的檢查 檢查痛覺(jué)、觸覺(jué)、溫覺(jué)、兩點(diǎn)區(qū)別覺(jué)及其改變范圍，判斷神經(jīng)損傷程度。一般檢查痛覺(jué)及觸覺(jué)即可。
注意感覺(jué)供給區(qū)為單一神經(jīng)或其它神經(jīng)供給重疊，可與健側(cè)皮膚比較。實(shí)物感與淺觸覺(jué)為精細(xì)感覺(jué)，痛覺(jué)與深觸覺(jué)為粗感覺(jué)。
神經(jīng)修復(fù)后，粗感覺(jué)恢復(fù)較早較好。 感覺(jué)功能障礙亦可用六級(jí)法區(qū)別其程度： 0級(jí)——完全無(wú)感覺(jué)； 1級(jí)——深痛覺(jué)存在； 2級(jí)——有痛覺(jué)及部分觸覺(jué)； 3級(jí)——痛覺(jué)和觸覺(jué)完全； 4級(jí)——痛、觸覺(jué)完全，且有兩點(diǎn)區(qū)別覺(jué)，惟距離較大； 5級(jí)——感覺(jué)完全正常。
5。營(yíng)養(yǎng)改變 神經(jīng)損傷后，支配區(qū)的皮膚發(fā)冷、無(wú)汗、光滑、萎縮。
坐骨神經(jīng)傷常發(fā)生足底壓瘡，足部?jī)鰝?。無(wú)汗或少汗區(qū)一般符合感覺(jué)消失范圍。
可作出汗試驗(yàn)，常用的方法有（1）碘—淀粉試驗(yàn)：在手指掌側(cè)涂2%碘溶液，干后涂抹一層淀粉，然后用燈烤，或飲熱水后適當(dāng)運(yùn)動(dòng)使病人出汗，出汗后變?yōu)樘m色。 （2）茚三酮（Ninhydrin）指印試驗(yàn)；將患指或趾在干凈紙上按一指?。ㄒ嗫稍跓犸嫲l(fā)汗后再按）。
用鉛筆畫(huà)出手指足趾范圍，然后投入1%茚三酮溶液中。如有汗液即可在指印處顯出點(diǎn)狀指紋。
用硝酸溶液浸泡固定，可長(zhǎng)期保存。因汗中含有多種氨基酸，遇茚三酮后變?yōu)樽仙?/p>
通過(guò)多次檢查對(duì)比，可觀察神經(jīng)恢復(fù)情況。 6。
反射 根據(jù)肌肉癱瘓情況，腱反射消失或減退。 7。
神經(jīng)近側(cè)斷端有假性神經(jīng)瘤，常有劇烈疼痛和觸痛，觸痛放散至該神經(jīng)支配區(qū)。 8。
神經(jīng)干叩擊試驗(yàn)（Tinel征） 當(dāng)神經(jīng)損傷后或損傷神經(jīng)修復(fù)后，在損傷平面或神經(jīng)生長(zhǎng)所達(dá)到的部位，輕叩神經(jīng)，即發(fā)生該神經(jīng)分布區(qū)放射性麻痛，稱(chēng)Tinel征陽(yáng)性。 二、電生理檢查 通過(guò)肌電圖及誘發(fā)電位檢查，判斷神經(jīng)損傷范圍、程度、吻合后恢復(fù)情況及預(yù)后。
3.比色法操作的注意事項(xiàng)是什么
噻唑藍(lán)（MTT）比色法操作注意事項(xiàng)
噻唑藍(lán)（MTT）：四唑鹽
1. 原理：
MTT比色法，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法.活細(xì)胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶干水的藍(lán)紫色產(chǎn)物，并沉淀在細(xì)胞中，而死細(xì)胞沒(méi)有這種功能。二甲亞砜（DMSO）能溶解沉積在細(xì)胞中藍(lán)紫色結(jié)晶物，溶液顏色深淺與活細(xì)胞數(shù)成正比。
2. 優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單快速、靈敏、經(jīng)濟(jì)
3. 缺點(diǎn)：由于MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物不溶于水，需被溶解后才能檢測(cè)。這不僅使工作量增加，也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響，而且溶解甲的有機(jī)溶劑對(duì)實(shí)驗(yàn)者也有損害。
4. 應(yīng)用：新藥篩選、細(xì)胞毒牲試驗(yàn)、腫瘤放射敏感性實(shí)驗(yàn)等
5. MTT主要有兩個(gè)用途
1）藥物（也包括其他處理方式如放射線(xiàn)照射）對(duì)體外培養(yǎng)的細(xì)胞毒性的測(cè)定；
2） 細(xì)胞增殖及細(xì)胞活性測(cè)定。
6. 比色法操作注意事項(xiàng)
1） 選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞接種濃度，保證細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束時(shí)濃度不至于過(guò)滿(mǎn)。
2） 種板技術(shù)：均勻。
3） 實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)設(shè)置調(diào)零孔，溶媒孔，加藥孔。
調(diào)零孔：培養(yǎng)基、MTT、DMSO。（無(wú)細(xì)胞）
溶媒孔：培養(yǎng)液、MTT、DMSO、細(xì)胞、溶酶。
加藥孔：培養(yǎng)液、MTT、DMSO、細(xì)胞、不同濃度的藥物。
（一般5-7個(gè)梯度，設(shè)3-5個(gè)復(fù)孔）
4）避免血清干擾：一般選小于10%胎牛血清的培養(yǎng)液進(jìn)行。
5）邊緣效應(yīng)：周邊孔加入PBS。
6)MTT的配置： MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液。4℃下避光保存2周。
7）孔板的重復(fù)利用（1.做完MTT后用大水流盡量將板沖凈，然后用洗衣粉水泡幾個(gè)小時(shí)（小心最好讓洗衣粉先化開(kāi)）。2.用自來(lái)水沖凈洗衣粉水，倒扣晾
干.3.重鉻酸鉀加濃硫酸配成的酸液中浸泡過(guò)夜泡洗液（六小時(shí)以上即可）后自來(lái)水洗凈（20次左右）每個(gè)孔都要處理4.用去離子水沖洗3遍，雙蒸水沖洗3
遍，烤干5.超凈臺(tái)中紫外線(xiàn)照射2個(gè)小時(shí)左右，就可以用了，不可以高壓?；蚺菟徇^(guò)夜，dd水沖洗干凈，烘干或者晾干后紫外照射30min以上即可使用。
8)MTT法只能用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力，但不能測(cè)定細(xì)胞絕對(duì)數(shù)。
9）在用酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果的時(shí)候，為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的線(xiàn)性，MTT 吸光度最好在0-0.7 范圍內(nèi)。
10)MTT有致癌性，用的時(shí)候小心，有條件最好帶那種透明的簿膜手套。
11）配成的MTT需要無(wú)菌，MTT對(duì)菌很敏感；往96孔板加時(shí)不避光也沒(méi)有關(guān)系，畢竟時(shí)間較短，或者你不放心的時(shí)候可以操作臺(tái)上的照明燈關(guān)掉。
4.指紋的顯現(xiàn)主要有什么方法
求指紋顯現(xiàn)方法有哪些？
1人回答
ssofa
高粉答主
2018-12-26
繁雜信息太多，你要學(xué)會(huì)辨別
關(guān)注謝謝你的關(guān)注
指紋顯現(xiàn)方法有：
一.光學(xué)識(shí)別技術(shù)
借助光學(xué)技術(shù)采集指紋是歷史最久遠(yuǎn)、使用最廣泛的技術(shù)。將手指放在光學(xué)鏡片上，手指在內(nèi)置光源照射下，用棱鏡將其投射在電荷耦合器件（CCD） 上，進(jìn)而形成脊線(xiàn)（指紋圖像中具有一定寬度和走向的紋線(xiàn)）呈黑色、谷線(xiàn)（紋線(xiàn)之間的凹陷部分）呈白色的數(shù)字化的、可被指紋設(shè)備算法處理的多灰度指紋圖像。
二.溫差感應(yīng)式識(shí)別技術(shù)
它的優(yōu)點(diǎn)是可在0.1s內(nèi)獲取指紋圖像，而且傳感器體積和面積最小，即通常所說(shuō)的滑動(dòng)式指紋識(shí)別儀就是采用該技術(shù)。缺點(diǎn)是：受制于溫度局限，時(shí)間一長(zhǎng)，手指和芯片就處于相同的溫度了。
三.半導(dǎo)體硅感技術(shù)（電容式技術(shù)）
半導(dǎo)體電容傳感器根據(jù)指紋的嵴和峪與半導(dǎo)體電容感應(yīng)顆粒形成的電容值大小不同，來(lái)判斷什么位置是嵴什么位置是峪。其工作過(guò)程是通過(guò)對(duì)每個(gè)像素點(diǎn)上的電容感應(yīng)顆粒預(yù)先充電到某一參考電壓。
5.用茚三酮法測(cè)蛋白水解度應(yīng)該怎樣做
如果已做完標(biāo)線(xiàn)，可以按下列公式進(jìn)行計(jì)算：
注意：將圖片放大，看得更清晰。公式中DH即為產(chǎn)物水解度（Degree of hydrolysis,DH）， 用于衡量蛋白質(zhì)的水解程度，定義為蛋白質(zhì)水解過(guò)程中被裂解的肽鍵數(shù)h(mmol/g蛋白質(zhì))與給定蛋白質(zhì)的總肽鍵數(shù)hhot (mmol/g蛋白質(zhì))。
補(bǔ)充：
1. 7.8 mmol/g是給定蛋白質(zhì)即大豆蛋白質(zhì)的總肽鍵數(shù)，以hhot(hot為h的右下標(biāo))表示。
2. 操作與計(jì)算：
(1)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 （因已做完，故略去）
(2)水解蛋白液中-NH2基的測(cè)定（茚三酮法）：取水解蛋白液0.50 mL定容至50 mL，取0.40 mL稀釋液于試管中并加入1.60 mL蒸餾水、1.00 mL顯色劑，混勻后置沸水浴中加熱15 min，同時(shí)作空白試驗(yàn)。以后操作同標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算水解蛋白液-NH2的含量（μmol/mL）。
(3)水解蛋白液中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定：取1.00 mL水解液進(jìn)行濕法消化處理，然后在蒸餾儀上蒸餾進(jìn)行人工滴定定氮，蛋白質(zhì)的含量表示為N*6.25 mg/mL。
(4)結(jié)果計(jì)算：原料蛋白質(zhì)中存在游離的-NH2基，在計(jì)算時(shí)要考慮它的影響，否則計(jì)算的DH值偏大。
