獲得dna指紋圖譜方法(DNA指紋圖譜分析原理與方法哪里有啊)
1.DNA指紋圖譜分析原理與方法哪里有啊
1984 年英國(guó)萊斯特大學(xué)的遺傳學(xué)家Jefferys及其合作者首次將分離的人源小衛(wèi)星DNA 用作基因探針，同人體核DNA 的酶切片段雜交，獲得了由多個(gè)位點(diǎn)上的等位基因組 成的長(zhǎng)度不等的雜交帶圖紋，這種圖紋極少有兩個(gè)人完全相同，故稱為"DNA指紋"，意思是它同人的指紋一樣是每個(gè)人所特有的。
DNA指紋的圖像在X光膠片中呈一系列條紋，很像商品上的條形碼。DNA 指紋圖譜，開(kāi)創(chuàng)了檢測(cè)DNA 多態(tài)性（生物的不同個(gè)體或不同種群在DNA結(jié)構(gòu)上存在著差異）的多種多樣的手段，如RFLP （限制性內(nèi)切酶酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性）分析、串聯(lián)重復(fù)序列分析、RAPD （隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 DNA ）分析等等。
各種分析方法均以DNA 的多態(tài)性為基礎(chǔ)，產(chǎn)生具有高度個(gè)體特異性的DNA 指紋圖譜，由于DNA 指紋圖譜具有高度的變異性和穩(wěn)定的遺傳性，且仍按簡(jiǎn)單的孟德?tīng)柗绞竭z傳，成為目前最具吸引力的遺傳標(biāo)記。
2.DNA指紋圖譜分析原理與方法哪里有啊
1984 年英國(guó)萊斯特大學(xué)的遺傳學(xué)家Jefferys及其合作者首次將分離的人源小衛(wèi)星DNA 用作基因探針，同人體核DNA 的酶切片段雜交，獲得了由多個(gè)位點(diǎn)上的等位基因組 成的長(zhǎng)度不等的雜交帶圖紋，這種圖紋極少有兩個(gè)人完全相同，故稱為"DNA指紋"，意思是它同人的指紋一樣是每個(gè)人所特有的。
DNA指紋的圖像在X光膠片中呈一系列條紋，很像商品上的條形碼。DNA 指紋圖譜，開(kāi)創(chuàng)了檢測(cè)DNA 多態(tài)性（生物的不同個(gè)體或不同種群在DNA結(jié)構(gòu)上存在著差異）的多種多樣的手段，如RFLP （限制性內(nèi)切酶酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性）分析、串聯(lián)重復(fù)序列分析、RAPD （隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 DNA ）分析等等。
各種分析方法均以DNA 的多態(tài)性為基礎(chǔ)，產(chǎn)生具有高度個(gè)體特異性的DNA 指紋圖譜，由于DNA 指紋圖譜具有高度的變異性和穩(wěn)定的遺傳性，且仍按簡(jiǎn)單的孟德?tīng)柗绞竭z傳，成為目前最具吸引力的遺傳標(biāo)記。DNA指紋圖譜分析原理與方法，生物幫上面有更加詳細(xì)的介紹的， /news/policy/ 生物產(chǎn)業(yè)政策，生物產(chǎn)業(yè)規(guī)劃，科研規(guī)劃。
3.用pcr,rflp,rapd方法產(chǎn)生dna指紋圖譜各有哪些利弊
PCR 作為現(xiàn)代生物學(xué)研究的一種常用方法，具有特異性高、靈敏度高、簡(jiǎn)便節(jié)約、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點(diǎn)；但是它最大的缺點(diǎn)是對(duì)不同的片段條件不同，所以 很難掌握，而且必須要得到目的基因片段。
RFLP 這種方法比較穩(wěn)定，但 RFLP 實(shí)驗(yàn)操作繁瑣，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，成本 較貴，不太適合大規(guī)模的分子育種。 PAPD 相對(duì) RFLP 來(lái)說(shuō)，更加省時(shí)省力，不需要進(jìn)行 DNA 多種酶切、轉(zhuǎn)膜以及探針的制備等多個(gè)步驟， 但是它不能用來(lái)測(cè)定多態(tài)性是由父本還是 母本產(chǎn)生的，而 RFLP 這種技術(shù)可以做到，而且 PADA 這項(xiàng)技術(shù)源于PCR 技術(shù)。
4.DNA指紋圖是怎樣構(gòu)成的
當(dāng)人還處在“人之初”的一個(gè)細(xì)胞時(shí)、就從父母那里各取到了“半張”生命的“施工圖”，構(gòu)成自己獨(dú)有的DNA譜表。
人的遺傳基因約10萬(wàn)個(gè)，每個(gè)均由A、T、G、C四種核苷酸，按次序排列在兩條互補(bǔ)的組成螺旋結(jié)構(gòu)的DNA長(zhǎng)鏈上。核苷酸總數(shù)達(dá)30億左右。
目前已經(jīng)查明，具有遺傳作用的DNA像小衛(wèi)星一樣分布在遺傳位點(diǎn)上。同一種族的“小衛(wèi)星”都有相同的核心序列，這是種族遺傳和個(gè)體具有相似性的物質(zhì)基礎(chǔ)。
同時(shí)，“小衛(wèi)星”的邊緣序列又具有高度的可變性，不同個(gè)體彼此不同，差異很大，這是種族內(nèi)個(gè)體呈現(xiàn)多樣化的重要內(nèi)因。對(duì)遺傳位點(diǎn)上的基因，經(jīng)過(guò)放射自顯影或酶顯色，就可得到像商品條形碼一樣的圖帶。
這種圖帶在個(gè)體之間就像人的指紋一樣各不相同，具有高度的特異性，這就是DNA指紋圖的由來(lái)。
5.在親緣關(guān)系的分析中DNA指紋圖譜鑒定法有何優(yōu)勢(shì)
（一） DNA鑒定在個(gè)人識(shí)別方面有著明確的誤差估計(jì)和較高的準(zhǔn)確率，因而更可靠?，F(xiàn)代生物識(shí)別技術(shù)有很多種，如指紋識(shí)別、聲紋鑒定、DNA鑒定、視網(wǎng)膜識(shí)別、虹膜識(shí)別、面部識(shí)別、唇紋識(shí)別等，應(yīng)用較多的是指紋識(shí)別和DNA識(shí)別。其中DNA技術(shù)應(yīng)是最重要的識(shí)別方法，因?yàn)镈NA是決定一個(gè)人的人體特征和行為特征的最根本的因素[7]。因此，從理論上說(shuō)DNA技術(shù)所能實(shí)現(xiàn)的個(gè)人識(shí)別率應(yīng)當(dāng)是很高的。而且DNA技術(shù)能明確計(jì)算出鑒定結(jié)論的誤差估計(jì)值，因而能減少由鑒定人的主觀臆斷導(dǎo)致的失誤，非?？陀^。如在Jeffreys首次用DNA技術(shù)所做的親子鑒定中，鑒定結(jié)論出錯(cuò)的概率是7*10-22，可以說(shuō)DNA鑒定結(jié)論的準(zhǔn)確率幾乎為100%[8]。
相反，指紋鑒定因不能量化說(shuō)明結(jié)果的誤差率，而顯得不夠客觀，再加上近來(lái)由鑒定失誤導(dǎo)致的錯(cuò)案的接連出現(xiàn)，使人不禁為其準(zhǔn)確性和可靠性擔(dān)憂[9]。目前對(duì)指紋技術(shù)的誤差率的研究都是零星的、局部的。如對(duì)3000枚隨機(jī)抽取的指紋進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)兩枚指紋的中心、三角部位或外圍系統(tǒng)等局部區(qū)域細(xì)節(jié)特征相似的情況較常見(jiàn)，其中三個(gè)特征相似的有5對(duì)，四個(gè)特征相似的有4對(duì)，五個(gè)特征相似的有2對(duì)，甚至七、八、十個(gè)特征相似的也有[10]。美國(guó)指紋專家曾在大會(huì)發(fā)言中說(shuō)：“我們?cè)谥讣y比對(duì)中發(fā)現(xiàn)來(lái)自于兩個(gè)人的指紋有四個(gè)特征點(diǎn)匹配是常有的事”[11]。到目前為止，還沒(méi)有系統(tǒng)的統(tǒng)計(jì)學(xué)方面的研究能充分說(shuō)明兩個(gè)人具備共有某一數(shù)量偶合點(diǎn)的指紋的可能性究竟有多大。因?yàn)檫@樣的研究涉及的因素、指標(biāo)和統(tǒng)計(jì)方法都非常復(fù)雜，樣本量又很龐大，比如要考慮到如何全面包括選取對(duì)象的種族、民族、部落、地區(qū)等因素，所有細(xì)節(jié)特征的種類、形態(tài)、位置、大小等因素，使用哪種數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)模型，樣本要多大才具備代表性等等，所以至今還沒(méi)有人進(jìn)行。而只有經(jīng)過(guò)全面系統(tǒng)地研究的結(jié)果才能被用做評(píng)估指紋鑒定結(jié)論客觀性的統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)。缺少這種統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)基礎(chǔ)給相似指紋和變形或模糊指紋的鑒定帶來(lái)較多麻煩，增大了鑒定失誤的可能性。所以，有人把DNA技術(shù)看作目前最可靠的個(gè)人識(shí)別技術(shù)。
（二）DNA技術(shù)所需檢材來(lái)源廣泛、量微，易于獲得。凡是人體細(xì)胞，只要含有一定量的大分子DNA，都可用于DNA分析。如血液（斑）、血痕、毛發(fā)、肌肉、骨髓、精液（斑）、牙髓及精液與陰道分泌物形成的混合斑、唾液（斑）等，甚至陳舊的、發(fā)霉長(zhǎng)菌的、經(jīng)其他方法處理失敗的生物斑痕或組織，都可提出DNA用于分析。而且，由于能應(yīng)用PCR技術(shù)將檢材中的DNA片段無(wú)限擴(kuò)增，所以DNA技術(shù)只需微量檢材就能解決問(wèn)題，有時(shí)甚至只需幾個(gè)人體細(xì)胞。上述兩方面情況就意味著要獲得DNA鑒定所需的檢材是比較容易的。
這一優(yōu)勢(shì)恰恰是包括指紋技術(shù)在內(nèi)的其他任何生物識(shí)別技術(shù)所不可比擬的。從現(xiàn)場(chǎng)發(fā)現(xiàn)和提取的指紋常常是殘缺、模糊、變形或重疊的指紋。由于這些指紋中的紋線特征不夠穩(wěn)定、可靠，甚至無(wú)法辨別，對(duì)它們的比對(duì)分析將難以進(jìn)行，即便得出結(jié)論，也不夠可靠、準(zhǔn)確。事實(shí)上指紋鑒定的失誤大多出現(xiàn)在此類情況下。
另外，人們還針對(duì)指紋識(shí)別技術(shù)鑒定潛在指紋的適當(dāng)性問(wèn)題提出了質(zhì)疑，即從現(xiàn)場(chǎng)提取到的指紋圖像與遺留人的真實(shí)指紋圖像的相似性問(wèn)題難以科學(xué)地解決?，F(xiàn)場(chǎng)上的指紋大多是不易發(fā)現(xiàn)的潛在指紋，需要進(jìn)行染色顯現(xiàn)和膠粘、吸附等轉(zhuǎn)印處理。“在指紋的轉(zhuǎn)印過(guò)程中，沉積物（附著物）、變形和色素的綜合作用影響了獨(dú)特的摩擦嵴紋被完全地可靠地轉(zhuǎn)印的能力，手印顯現(xiàn)操作的技術(shù)水平也可能影響指紋的反映質(zhì)量，損害指紋的獨(dú)特性”。“在顯現(xiàn)潛在指紋的過(guò)程中，壓力、變形、染色劑、物屑和操作處理帶來(lái)的變化影響了原來(lái)的摩擦嵴紋的細(xì)節(jié)特征的穩(wěn)定性。”[12]因此，有人指出運(yùn)用各種處理方法從現(xiàn)場(chǎng)提取到的二維指紋圖像與原來(lái)的指紋在細(xì)節(jié)特征上是否一致，值得懷疑。而將這樣的潛在指紋圖像用于比對(duì)的做法，其科學(xué)性令人擔(dān)心。因此有人認(rèn)為，相比之下DNA技術(shù)有著更為廣闊的應(yīng)用前景。
6.什么是DNA分子標(biāo)記指紋圖譜鑒定
DNA分子標(biāo)記指紋圖譜鑒定是根據(jù)任何一個(gè)品種，都具有該品種所特有的細(xì)胞遺傳學(xué)上的特征，利用分子標(biāo)記技術(shù)，如限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（簡(jiǎn)稱RFLP）、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（簡(jiǎn)稱RAPD）、小衛(wèi)星DNA、微衛(wèi)星DNA、擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（簡(jiǎn)稱AFLP）等技術(shù)，可以直接反應(yīng)不同品種在DNA水平上的差異，借此來(lái)鑒別不同品種，進(jìn)行品種真實(shí)性和品種純度測(cè)定。
所以，利用分子標(biāo)記技術(shù)，通過(guò)對(duì)鑒定品種的細(xì)胞遺傳學(xué)性狀和分子標(biāo)記特征進(jìn)行識(shí)別來(lái)鑒別不同品種的方法，稱之為DNA分子標(biāo)記指紋圖譜鑒定。
