答:原則是適宜的切口應(yīng)該符合下類要求:切口需接近病變部位,最好能直接到達(dá)手術(shù)區(qū),并能根據(jù)手術(shù)需要,便于延長擴(kuò)大;切口在體側(cè)、頸側(cè)以垂直于地面或斜行的切口為好,體背、頸背和腹下沿體正中線的矢狀線的縱向切口比較合理;切口避免損傷大血管、神經(jīng)和腺體的輸出管,以免影響術(shù)部組織或器官的機(jī)能;切口應(yīng)該有利于創(chuàng)液的排出;二次手術(shù)時(shí),應(yīng)該避免在瘢痕上切開,因?yàn)轳:劢M織再生力弱,易發(fā)生彌漫性出血。
注意事項(xiàng):(1)切口大小必須適當(dāng)。切口過小,不能充分顯露;作不必要的大切口,會(huì)損傷過多組織。
(2)切開時(shí),必按解剖層次分層進(jìn)行,并注意保持切口從外到內(nèi)的大小相同。切口兩側(cè)要用無菌巾覆蓋、固定,以免操作過程中把皮膚表面細(xì)菌帶入切口,造成污染。
(3)切開組織必須整齊,力求一次切開。手術(shù)刀與皮膚、肌肉垂直,防止斜切或多次在同一平面上切割,造成不必要的組織損傷。
(4)切開深部筋膜時(shí),為了預(yù)防深層血管和神經(jīng)的損傷,可先切一小口,用止血鉗分離張開,然后再剪開。
(5)切開肌肉時(shí)要沿肌纖維方向用刀柄或手指分離,少做切斷,以減少損傷,影響愈合。
(6)切開腹膜、胸膜時(shí),要預(yù)防內(nèi)臟損傷。
(7)切開骨組織時(shí),先要切割分離骨膜,盡可能地保存其健康部分,以利于骨組織愈合。
組織切開是顯露手術(shù)野的重要步驟。淺表部位手術(shù),切口可直接位于病變部位上或附近。深部切口,根據(jù)局部解剖特點(diǎn),既要有利于顯露術(shù)野,又不能造成過多的組織損傷。適宜的切口應(yīng)該符合下列要求:
1、切口須接近病變部位,最好能直接到達(dá)手術(shù)區(qū),并能根據(jù)手術(shù)需要,便于延長擴(kuò)大。
2、切口在體側(cè)、頸側(cè)以垂直于地面或斜行的切口為好,體背、頸背和腹下沿體正中線或靠近正中線的矢狀線的縱行切口比較合理。
3、切口避免損傷大血管、神經(jīng)和腺體的輸出管,以免影響術(shù)部組織或器官的機(jī)能。
4、切口應(yīng)該有利于創(chuàng)液的排出,特別是膿汁的排出。
5、二次手術(shù)時(shí),應(yīng)該避免在瘸痕上切開,因?yàn)樘岛劢M織再生力弱,易發(fā)生彌漫性出血。
需要。
切片一系列工作完成后,就要進(jìn)行染色和封片了。由于要染色的切片尚包在石蠟中,而所用的染色液都為水溶液,因此在染色之前,必須再度復(fù)水。
與固定的組織塊脫水、透明的步驟相反,石蠟切片先在二甲苯中溶去石蠟,再經(jīng)過各級(jí)酒精,下行至水。染色后,如果組織片中有水分,則光不宜通透,在顯微鏡下觀察不清組織的結(jié)構(gòu),所以必須經(jīng)過脫水。
給你我們學(xué)校的實(shí)驗(yàn)講義看看吧~希望對(duì)你有幫助~有不懂的地方問我~實(shí)驗(yàn)一 石蠟包埋切片技術(shù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、學(xué)習(xí)石蠟包埋切片技術(shù)的基本原理和基本步驟;2、掌握石蠟包埋切片技術(shù)。實(shí)驗(yàn)原理:大家在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí),曾經(jīng)觀察過動(dòng)物組織和植物組織的切片。
通過光學(xué)顯微鏡,我們可以觀察到細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)(例如細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、肌肉組織的橫紋等)、細(xì)胞相互間的聯(lián)系以及組織的構(gòu)成等。那么,如何來制作這種切片呢?其過程是比較復(fù)雜的,我們利用3—4次實(shí)驗(yàn)來學(xué)習(xí)組織切片的制作。
大家知道,我們要在顯微鏡下研究生物體的內(nèi)部結(jié)構(gòu),在自然狀態(tài)下是無法觀察的,因?yàn)檎麄€(gè)動(dòng)、植物體大部分都是不透明的,不能直接在顯微鏡下觀察,一定要經(jīng)過特殊的處理,使要觀察的材料先減少它的厚度和體積,使光線能透過才能用顯微鏡觀察。通常應(yīng)用的有兩種方法:一種是非切片法,即用物理或化學(xué)的方法將生物體組織分離成為單個(gè)細(xì)胞或薄片,例如我們?cè)谏飳W(xué)實(shí)驗(yàn)曾做過口腔上皮的觀察、洋蔥鱗莖表皮的觀察。
這種方法的不足之處在于細(xì)胞彼此間相互的聯(lián)系不一定觀察到。另外一種為切片法,即用刀將標(biāo)本切成薄片。
非切片法比較簡單,一學(xué)就會(huì),我們這里不作介紹。切片法也分徒手切片法和切片機(jī)切片法。
最簡單的切片法是將新鮮植物材料直接用刀切成薄片,稱之為徒手切片法。切片機(jī)切片法是用特殊的切片機(jī)來切片,切片的厚度可薄到幾個(gè)微米。
因此,切片機(jī)的發(fā)明與應(yīng)用也是細(xì)胞學(xué)誕生的重要因素。切片機(jī)切組織用的也是刀(切片刀),所要切的組織要有一定的軟硬度,如刀切肉(新鮮、冷凍)。
但大部分生物材料比較柔軟,所以為了能切出薄片,必須先使所切材料有一定的軟硬度。一些包埋劑可以達(dá)到這個(gè)目的,如石蠟,它融化時(shí)可滲入到組織內(nèi)部;凝固時(shí),使整個(gè)組織有一定的軟硬度,正好能切出很薄的切片,故稱為石蠟包埋切片法。
另外還有火棉膠包埋切片法(火棉膠做包埋劑)、冰凍切片法(使組織冷凍到一定的硬度)等。其中最常用的切片方法還是石蠟包埋切片法,我們這里重點(diǎn)學(xué)習(xí)石蠟包埋切片技術(shù)。
實(shí)驗(yàn)器材:(一)小鼠、小廣口瓶、標(biāo)簽、量筒、燒杯、95%酒精、無水酒精、蒸餾水、手術(shù)刀、剪刀、鑷子、平皿、石蠟塊、濾紙、甲醛液、苦味酸、冰醋酸、移液管、洗耳球。(二)恒溫箱、融蠟、紙盒、燙板、支架、酒精燈、火柴、小鑷子、濾紙。
(擦載玻片、磨刀、液體石蠟)。(三)手術(shù)刀、木板、酒精燈、火柴、鋸條、木塊、塑料板、切片刀、切片機(jī)、毛筆、小鑷子、載玻片、蛋白甘油、恒溫水浴箱、溫度計(jì)、大白盤。
實(shí)驗(yàn)步驟:制作小鼠肝、脾、腎、小腸等切片。1、取材:取材是指從動(dòng)物或植物體上割取所要觀察的組織材料,比如植物的莖、葉,動(dòng)物的肝臟、小腸等。
取材時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn):(1)新鮮:在割取材料時(shí)應(yīng)愈快愈好,否則動(dòng)植物體的細(xì)胞成分、結(jié)構(gòu)及分布等就會(huì)發(fā)生改變。(2)防止人為損傷:如生拉硬拽、擠壓等,以免出現(xiàn)人為損傷。
(3)大?。?.5 cm * 0.5 cm * 0.2cm。2、固定:機(jī)體死亡或組織離體后,組織細(xì)胞由于血液供應(yīng)停止,即可發(fā)生缺氧,導(dǎo)致生物氧化過程停止。
相反,細(xì)胞內(nèi)的無氧酵解酶類活躍,使組織內(nèi)蛋白質(zhì)、糖、脂肪降解,導(dǎo)致組織發(fā)生自溶。另外,組織也可因污染細(xì)菌而發(fā)生腐敗。
因此,為了使細(xì)胞和組織結(jié)構(gòu)保持生活時(shí)的狀態(tài),必須進(jìn)行適當(dāng)?shù)墓潭ā9潭ǖ哪康脑谟诒4娼M織內(nèi)細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)及其組成,使其與生活時(shí)相似。
固定組織的物質(zhì)——固定劑——具有凝固或沉淀組織蛋白的作用,因此能抑制酵解酶類的活動(dòng)和細(xì)菌的繁殖,從而呈現(xiàn)對(duì)組織的固定作用。固定劑的種類很多,最常見的有乙醇、甲醛、冰醋酸、苦味酸、鉻酸、重鉻酸鉀、氯化汞和鋨酸等8種。
各種固定劑對(duì)蛋白質(zhì)、脂肪、糖等作用不同,因此,單一的固定劑不能保存所有的成分,故多用混合固定劑。各種書籍對(duì)固定劑的介紹特別多,如化學(xué)性質(zhì)、固定的原理、固定組織的優(yōu)缺點(diǎn)等,由于時(shí)間的所限,我們這里不作詳細(xì)介紹,僅介紹幾種常見的固定液及其配方和用途。
(1)10%福爾馬林液:1份甲醛液 + 9份蒸餾水市場上出售的甲醛液約含37-40%的甲醛,10%福爾馬林液實(shí)際上僅含3.7-4.0%的甲醛。適用范圍:各種組織。
但是經(jīng)10%福爾馬林液固定的組織,細(xì)胞核染色較好,而細(xì)胞質(zhì)染色較差。處理:組織塊一般固定16-24h,長時(shí)間亦可,甚至可用來長期保存組織塊。
短時(shí)間固定的組織塊不需水洗,可直接轉(zhuǎn)入70%酒精脫水。(2)Bouin氏液:苦味酸飽和水溶液(1.22%) 75ml (15)甲醛液 25ml (5)冰醋酸 5ml (1)適用范圍:各種動(dòng)物組織及植物組織的根尖,是動(dòng)物組織良好的固定液。
處理:固定24h,也可在此液長期保存。流水沖洗或不經(jīng)水洗直接入70%酒精脫水。
腦皮質(zhì)致癇灶切除術(shù)
:為較常用、也是效果較好的方法,如腦部有明顯的占位病變?nèi)缒[瘤、腦膿腫、炎性病灶、血管畸形、腦囊腫等,經(jīng)腦電監(jiān)測(cè)切除致癲癇灶和病灶,手術(shù)后約60%-90%的癲癇可以治愈。
前顳葉切除術(shù)
:目前應(yīng)用最多的手術(shù)方法,如果定位準(zhǔn)確約80%以上的病人手術(shù)后癲癇發(fā)作可完全停止,且很少引起功能損傷。
選擇性杏仁核、海馬切除術(shù)
:選擇性切除杏仁核和海馬,避免顳葉皮層的操作。癲癇完全控制率為42.85%,有效率為85.71%。
大腦半球切除術(shù)
:適用于頑固性癲癇、致癲癇灶累及大部或全部一側(cè)大腦半球的患者,對(duì)側(cè)已有功能代償、WADA試驗(yàn)證實(shí)言語中樞位于健側(cè)半球者。癲癇控制和有效率近100%。
胼胝體切開術(shù)
:胼胝體是連接左右大腦半球的神經(jīng)組織,是癲癇放電向?qū)?cè)傳導(dǎo)和連接的纖維,將其切斷的目的就是將癲癇放電限制在異常的一側(cè),并對(duì)其放電有一定的抑制作用,使癲癇發(fā)作局限,此手術(shù)較適用于致癲癇灶廣泛、多發(fā)或位于重要功能區(qū)不能切除者,手術(shù)后僅5%-0%停止發(fā)作,約65%-75%明顯改善,也有個(gè)別病人發(fā)作增加。
多處軟膜下橫纖維切斷術(shù)
:手術(shù)在多處軟腦膜下切斷神經(jīng)元的橫向纖維,以阻斷癲癇病灶神經(jīng)元同步放電的擴(kuò)散。主要適用于癲癇灶位于重要功能區(qū)的難治性癲癇。
立體定向手術(shù)
:此手術(shù)優(yōu)點(diǎn)是不需開顱、對(duì)腦組織損傷小,但對(duì)定位的精確性要求較高。手術(shù)的目的是通過立體定向破壞致癲癇的神經(jīng)核團(tuán)、癲癇放電擴(kuò)散神經(jīng)纖維,一些不適合開顱手術(shù)的難治性癲癇可選用此手術(shù)治療。
慢性電刺激術(shù)和迷走神經(jīng)刺激術(shù)
:慢性腦刺激術(shù)是將特制的深部腦刺激電極,放置于雙側(cè)小腦皮層的前葉、后葉或丘腦等部位,通過埋于皮下的刺激發(fā)生裝置刺激小腦或丘腦核團(tuán),從而達(dá)到抑制癲癇發(fā)作的目的,此方法較適用于全身性或雙側(cè)顳葉有病灶的患者,臨床療效可達(dá)70%。迷走神經(jīng)刺激術(shù)是將微型刺激器埋植在左鎖骨下皮下組織,將電極經(jīng)皮下隧道引入頸下部,纏繞在迷走神經(jīng)上,通過刺激抑制癲癇發(fā)作,有效率在50%-75%不等。
切除污染創(chuàng)面要由外向內(nèi),由淺入深,逐步進(jìn)行,并使切除過的新鮮創(chuàng)面不再污染,這是清創(chuàng)術(shù)中預(yù)防感染的重要環(huán)節(jié)之一。
(1)首先用浸有過氧化氫液的滅菌紗布?jí)K或脫脂棉覆蓋創(chuàng)口,然后剪除創(chuàng)圍被毛。剪毛范圍要在創(chuàng)圍20~25厘米處。用肥皂水清洗創(chuàng)緣周圍皮膚,最后剃凈被毛。用3%碘酒、75%酒精消毒,鋪蓋消毒巾,準(zhǔn)備清創(chuàng)。
(2)用大量鹽水沖洗創(chuàng)口,并用紗布、棉球清拭創(chuàng)內(nèi)污染物。對(duì)皮膚的處理原則是,切除已壞死的創(chuàng)緣皮膚,但盡量保存有活力的部分,以免縫合時(shí)張力過大,并考慮創(chuàng)緣對(duì)合整齊。邊緣不整的創(chuàng)緣應(yīng)盡量切修整齊。
壞死污染而不出血的皮下組織,都要切除干凈,直到健康出血部為止。撕裂創(chuàng)剝脫皮瓣上的皮下組織,要徹底切除。小而深的創(chuàng)傷,在切除創(chuàng)緣和皮下組織后,要沿創(chuàng)口的縱軸方向或被毛方向切開皮膚與皮下組織,擴(kuò)大創(chuàng)口,以便進(jìn)行深部組織清洗。
(3)深筋膜的破碎和污染部分,必須全部切除,并按原皮膚切口方向切開筋膜。目的在于顯露全部創(chuàng)腔,充分解除深層組織的張力。深筋膜切開是否充分,是清創(chuàng)術(shù)能否有效地解除深層組織張力的關(guān)鍵問題之一。因而,如果必要時(shí),可作深筋膜十字形或雙十字形切口,使深筋膜徹底松弛。
(4)壞死的肌肉應(yīng)切除。凡肌肉呈暗紅色,用鉗鑷夾之無收縮,或用刀切割而不出血,都是已壞死的肌肉,應(yīng)予切除,一直切至出血時(shí)為止。壞死肌肉切除不徹底,極易造成厭氣桿菌(氣性壞疽、破傷風(fēng))繁殖和發(fā)病的條件。如有碎骨片或異物,應(yīng)盡量取出。
(5)血管、神經(jīng)和肌腱的損傷,應(yīng)根據(jù)具體情況分別處理。最后用滅菌生理鹽水輕輕沖洗創(chuàng)腔,清除一切細(xì)小的異物、血凝塊和組織碎片,徹底止血。清創(chuàng)后是否進(jìn)行初期縫合,應(yīng)根據(jù)病畜局部污染程度、傷后經(jīng)過時(shí)間、清創(chuàng)徹底程度、術(shù)后護(hù)理?xiàng)l件等考慮決定。這些因素中只有時(shí)間因素較為恒定,其他因素都有較大幅度的變動(dòng)。大體上在傷后8小時(shí)內(nèi)得到清創(chuàng)處理,可作初期連續(xù)或間斷縫合,8~24小時(shí)內(nèi)得到清創(chuàng)處理,以定位縫合加引流或僅作引流,爭取延期縫合較為合適,24小時(shí)清創(chuàng)的僅作引流,爭取延期縫合。胸、腹壁透創(chuàng),雖在24小時(shí)以上得到清創(chuàng)處理,術(shù)后仍應(yīng)考慮初期縫合或定位縫合加引流。
(6)創(chuàng)腔內(nèi)有神經(jīng)、血管、肌腱、骨骼暴露時(shí),即使不做初期縫合,也要用鄰近肌瓣將這些組織覆蓋,并作簡單的定位縫合,或8字形縫合,以防暴露特殊組織發(fā)生壞死或感染,造成不良后果。但絕不應(yīng)縫合深筋膜,以防深部組織腫脹時(shí)其張力得不到解除,并影響引流。
(7)可做初期縫合的創(chuàng)口,如因皮膚缺損較多不能直接縫合,或勉強(qiáng)縫合后張力過大時(shí),可在距原創(chuàng)口一側(cè)或兩側(cè)5~6厘米處,作等長的減張切口,縫合原創(chuàng)口。減張切口可以根據(jù)情況直接縫合。不能做初期縫合的創(chuàng)口,用鹽水紗布疏松的引流。引流物要深入到創(chuàng)腔深部各個(gè)死角,但不要起填塞作用。較長的創(chuàng)口可在兩端縫合2~3針,使創(chuàng)口縮小,有利于創(chuàng)面的對(duì)合、愈合,并爭取延期縫合。
(8)頸部與前后肢上部軟組織中,深厚強(qiáng)大的肌群發(fā)生開放性創(chuàng)傷,若創(chuàng)腔深廣,經(jīng)清創(chuàng)后應(yīng)在創(chuàng)腔的低位做反對(duì)口引流。方法是在創(chuàng)底用止血鉗于兩肌之間分離,直達(dá)創(chuàng)口附近低位引流的欲作反對(duì)口。切開欲作反對(duì)口的皮膚、皮下組織和深筋膜,使原創(chuàng)腔與反對(duì)口交通,將引流物由原創(chuàng)口引伸到反對(duì)口。此法既可減少血管、神經(jīng)的損傷,又能獲得良好的引流。
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