多倍體誘導后可通過哪些方法鑒定(植物的多倍體誘導及其觀察實驗報告)

1.植物的多倍體誘導及其觀察實驗報告

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內(nèi)容來自用戶：夢落西湖

植物多倍體的誘導及其鑒定

一、實驗目的1、通過實驗，掌握化學誘導植物多倍體的原理以及方法，學習利用秋水仙素誘導植物多倍體的一般方法及多倍體誘導在植物育種上的意義。

2.學習利用細胞學方法觀察鑒定多倍體的特點以及誘導染色體加倍后的細胞學表現(xiàn)，利用染色體分析的方法對多倍體的細胞做出準確判斷。

二、實驗原理

生物體的細胞核中都有相對穩(wěn)定的染色體數(shù)目，這是物種的基本特征之一。多倍體是細胞中具有3個或3個以上的染色體組的生物體。在植物育種上，利用多倍體可以改良作物的經(jīng)濟性狀，同時還可以利用多倍體克服遠緣雜交過程中的障礙。

利用一些化學因素誘導植物產(chǎn)生多倍體，秋水仙素是誘導多倍體形成最有效和常用的藥品之一，利用秋水仙素處理正在進行有絲分裂的細胞，可以抑制紡錘絲的形成，使細胞有絲分裂中期紡錘絲斷裂或紡錘體形成受抑制，有絲分裂后期，復制的染色體無法移向兩級，細胞內(nèi)的染色體加倍，形成多倍體。因此在適宜濃度的秋水仙素作用下，它既可以有效的阻止紡錘體的形成，又不至于對細胞發(fā)生較大的毒害，因此，細胞經(jīng)一定時期后仍可恢復正常，繼續(xù)分裂，只是染色體數(shù)目加倍成為多倍性細胞，并在此基礎上進一步發(fā)育成為多倍體植物。將秋水仙素處理的植物根尖，2（答：因為在同時，從細胞內(nèi)染色體數(shù)目的變化來看，對照組中

2.植物的多倍體誘導及其觀察實驗報告

去百度文庫，查看完整內(nèi)容>內(nèi)容來自用戶：夢落西湖植物多倍體的誘導及其鑒定一、實驗目的1、通過實驗，掌握化學誘導植物多倍體的原理以及方法，學習利用秋水仙素誘導植物多倍體的一般方法及多倍體誘導在植物育種上的意義。

2.學習利用細胞學方法觀察鑒定多倍體的特點以及誘導染色體加倍后的細胞學表現(xiàn)，利用染色體分析的方法對多倍體的細胞做出準確判斷。二、實驗原理生物體的細胞核中都有相對穩(wěn)定的染色體數(shù)目，這是物種的基本特征之一。

多倍體是細胞中具有3個或3個以上的染色體組的生物體。在植物育種上，利用多倍體可以改良作物的經(jīng)濟性狀，同時還可以利用多倍體克服遠緣雜交過程中的障礙。

利用一些化學因素誘導植物產(chǎn)生多倍體，秋水仙素是誘導多倍體形成最有效和常用的藥品之一，利用秋水仙素處理正在進行有絲分裂的細胞，可以抑制紡錘絲的形成，使細胞有絲分裂中期紡錘絲斷裂或紡錘體形成受抑制，有絲分裂后期，復制的染色體無法移向兩級，細胞內(nèi)的染色體加倍，形成多倍體。因此在適宜濃度的秋水仙素作用下，它既可以有效的阻止紡錘體的形成，又不至于對細胞發(fā)生較大的毒害，因此，細胞經(jīng)一定時期后仍可恢復正常，繼續(xù)分裂，只是染色體數(shù)目加倍成為多倍性細胞，并在此基礎上進一步發(fā)育成為多倍體植物。

將秋水仙素處理的植物根尖，2（答：因為在同時，從細胞內(nèi)染色體數(shù)目的變化來看，對照組中。

3.簡述植物多倍體誘導實驗中觀察植物根尖染色體數(shù)目、形態(tài)的實驗步驟

一、實驗目的：1.了解人工誘導多倍體的原理，初步掌握用秋水仙素誘發(fā)多倍體的方法。

2.了解植物多倍體細胞染色體加倍的特點。二、實驗原理 自然界各種生物的染色體數(shù)目是相對恒定的，這是物種的重要特征。

遺傳學上把一個配子的染色體數(shù)，稱為染色體組（或稱基因組），用n表示。一個染色體組內(nèi)每個染色體的形態(tài)和功能各不相同，但又互相協(xié)調(diào)，共同控制生物的生長和發(fā)育、遺傳和變異。

由于各種生物的來源不同，細胞核內(nèi)可能具有一個或一個以上的染色體組，凡是細胞核中含有一套完整染色體組的就叫做單倍體，也用n表示。具有兩套染色體組的生物體稱為二倍體，以2n表示。

細胞內(nèi)多于兩套染色體組的生物體稱為多倍體，這類生物細胞內(nèi)染色體數(shù)目的變化是以染色體組為單位進行增減的，所以稱作整倍體。多倍體普遍存在于植物界，目前已知道被子植物中約有l(wèi)/3或更多的物種是多倍體，除了自然發(fā)生的多倍體物種之外，還可采用高溫、低溫、X射線照射、嫁接和切斷等物理方法人工誘發(fā)多倍體植物。

在誘發(fā)多倍體方法中以應用化學藥劑更為有效。如秋水仙素、異生長素，富民農(nóng)等，都可以誘發(fā)多倍體，其中以秋水仙素溶液效果最好，使用最為廣泛。

秋水仙素溶液的主要作用是抑制細胞分裂時紡錘體的形成，使染色體向兩極的移動被阻止，而停留在分裂中期的分布，這樣細胞不能繼續(xù)分裂，從而產(chǎn)生染色體數(shù)目加倍的核。若染色體加倍的細胞繼續(xù)分裂，就形成多倍性的組織.由多倍性組織分化產(chǎn)生的性細胞，可通過有性繁殖方法把多倍體繁殖下去。

如果將種子用秋水仙素浸漬，也可誘導多倍體植株產(chǎn)生。多倍體已成功地應用于植物育種。

用人工方法誘導的多倍體，可以得到一般二倍體所沒有的優(yōu)良經(jīng)濟性狀，如粒大、穗長、抗病性強等。三倍體西瓜、三倍體甜菜、八倍體小黑麥已在生產(chǎn)上得到廣泛的應用。

染色體加倍后必須進行鑒別，同源多倍體主要是根據(jù)形態(tài)特性來判斷，如葉色、葉形及氣孔和花粉粒的大小。最為可靠的方法，是待收獲大粒種子后，再將這些大粒種子萌發(fā)，制備根尖壓片，然后檢查細胞內(nèi)的染色體數(shù)目，只有染色體數(shù)目加倍了，才能證明植株已誘變成為多倍體。

三、實驗材料 玉米（2n=20），大麥（2n=18）、水稻（2n=24）的種子，或洋蔥的鱗莖。四、實驗器具和藥品：l.用具：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿、鑷子、刀片、滴管，吸水紙和測微尺。

2.藥品：0.1%和0.025%秋水仙素溶液，1mol/L HCl溶液 、改良苯酚品紅溶液。五.實驗步驟1. 先剪去洋蔥的老根，然后置于盛滿水的燒杯口上，等新長出的不定根長約1.5-2mm左右時，移到盛有0.01-0.1%濃度的秋水仙素中，直到根尖膨大為止。

誘導后細胞為多倍體細胞。也可以采用種子浸漬法。

處理種子時，可先在—定濃度秋水仙素溶液中浸種24小時左右，在鋪有濾紙的器皿上浸漬種子。再注入0.1%-0.025%濃度的秋水仙素溶液，為避免蒸發(fā)宜加蓋并置于暗處，放入20℃培養(yǎng)箱中，保持適宜的發(fā)芽溫度，干燥種子處理的天數(shù)應比浸種多l(xiāng)天左右。

一般發(fā)芽種子處理數(shù)小時至三天或多至十天左右。對于種皮厚發(fā)芽慢的種子，應先催芽后再行處理。

已發(fā)芽的種子用較低的濃度處理較短的時間，秋水仙素能阻礙根系的發(fā)育，因而最好能在發(fā)根以前處理完畢。處理后用清水沖洗，移栽于盆缽或田間。

所誘導種子長成的植株為多倍體植株。蠶豆根尖端處理時，秋水仙素濃度比洋蔥根尖高，在1%以上。

也可在植株的芽原基處進行處理，誘導芽變，形成多倍體枝條，再將其進行扦插以獲得多倍體植株。2.取下已膨大的根尖或幼芽，水洗后進行常規(guī)制片（固定，保存，水洗，酸解，水洗，制片，染色，壓片等過程），染色時滴上一、二滴改良苯酚品紅染液，10-15分鐘以后壓片。

3.觀察多倍體細胞染色體的形態(tài)并統(tǒng)計其染色體數(shù)目。六、注意事項：1. 秋水仙素處理時間應根據(jù)供試材料的細胞周期而定，當處理時間介于供試材料細胞周期的一倍到兩倍之間時，可觀察到細胞由二倍體變?yōu)樗谋扼w，當處理時間多于供試材料細胞周期的兩倍以上時，供試材料的細胞可從四倍體變?yōu)榘吮扼w，因此，在培養(yǎng)多倍體細胞時，應注意用秋水仙素的處理時間；此外，秋水仙素的濃度對處理效果也有影響，應注意掌握。

2. 多倍體細胞中染色體的形態(tài)有兩種，一種為一條染色體含有一條單體，另一種為一條染色體含有兩條單體，應注意觀察，并思考其形成原因。3. 秋水仙素為劇毒藥品，實驗中應注意不要將藥品沾到皮膚上，眼睛中。

如果沾到皮膚上，應用大量自來水沖洗。

4.怎么通過誘導多倍體的方法克服遠緣雜交不育

由于種屬間存在著種種隔離機制，致使遠緣雜交常表現(xiàn)不親和或獲得的遠緣雜種表現(xiàn)不育。

當選定作親本的兩個種，存在著交配不親和的情況下，可以選擇與雙親或雙親中的一方能夠進行交配的第三個種，先與某一親本進行雜交，然后利用得到的雜種作為媒介者，再與另一親本雜交，以克服所選定的兩種親本之間的不親和性，這個方法稱為媒介法。選定作雜交的兩個種，若存在交配不親和時，可在雜交之前，預先將兩者接在一起。

其中一個親本應選用已結(jié)果的成年樹，將另一親本種的接穗嫁接在它的樹冠上。作接穗的親本中，最好選用年幼的實生芽條。

通過嫁接，為使砧木對接穗發(fā)揮更大的影響，砧木必須留有足夠的枝葉?？朔h緣雜種不育的方法：雜種胚的離體培養(yǎng)，將遠緣雜交所得到的種子，或在其發(fā)育中期取出幼胚，置于人工配制的培養(yǎng)基上，在無菌條件下培養(yǎng)，以促進幼胚萌發(fā)發(fā)育成小苗，應用離體培養(yǎng)法有利于克服雜種種子不發(fā)芽或幼胚中途敗育。

雜種染色體加倍，對于能生長發(fā)育成苗，但不能結(jié)實結(jié)籽的遠緣雜種，可在種子發(fā)芽的初期或幼苗期，用0.1-0.3%的秋水仙堿處理一定時間，使體細胞染色體加倍，獲得雙二倍體。雙二倍體在形成配子的減數(shù)分裂過程，每個染色體都有相應的同源染色體可以正常聯(lián)合配對，因此能產(chǎn)生具有二重染色體組的有生活力配子，從而能提高受精結(jié)實率。