使用生物顯微鏡時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)
⒈取放時(shí)動(dòng)作一定要輕,切忌震動(dòng)和暴力,否則會(huì)造成光軸偏斜而影響觀察,而且光學(xué)玻璃也容易損壞。
⒉由于物鏡的螺絲口容易損傷,安裝物鏡時(shí)要特別小心,即先向左方倒轉(zhuǎn)一小段,凹凸雙方吻合后再向右方旋轉(zhuǎn),不要轉(zhuǎn)的太緊,輕輕捻到頭,再稍緊即可。
⒊鏡檢標(biāo)本應(yīng)嚴(yán)格按照操作程序進(jìn)行,觀察時(shí)要從低倍鏡開始,看清標(biāo)本后再轉(zhuǎn)用高倍鏡、油鏡。
⒋使用油鏡時(shí)一定要在蓋玻片上滴油后才能使用。油鏡使用完后,應(yīng)立即將鏡頭、蓋玻片上的油擦干凈,否則干后不易擦去,以致?lián)p傷鏡頭和標(biāo)本。但應(yīng)注意二甲苯用量不可過多,否則,物鏡中的樹膠溶解,透鏡歪斜甚至脫落,蓋玻片移動(dòng)甚至連同標(biāo)本一起融掉。
⒌使用時(shí)不可用手摸光學(xué)玻璃部分,如需擦拭應(yīng)嚴(yán)格按照光學(xué)部件擦拭辦法。
⒍使用的蓋玻片和載玻片不能過厚或過薄。標(biāo)準(zhǔn)的蓋玻片為0.17±0.02毫米,載玻片為1.1±0.04毫米。過厚或過薄將會(huì)影響顯微鏡成像及觀察。
1.低倍鏡的使用方法
(1)取鏡和放置:顯微鏡平時(shí)存放在柜或箱中,用時(shí)從柜中取出,右手緊握鏡臂,左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,鏡座后端距桌邊1-2寸為宜,便于坐著操作。
(2)對(duì)光:用拇指和中指移動(dòng)旋轉(zhuǎn)器(切忌手持物鏡移動(dòng)),使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)的通光孔(當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)聽到碰叩聲時(shí),說明物鏡光軸已對(duì)準(zhǔn)鏡筒中心)。打開光圈,上升集光器,并將反光鏡轉(zhuǎn)向光源,以左眼在目鏡上觀察(右眼睜開),同時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡方向,直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。
(3)放置玻片標(biāo)本:取一玻片標(biāo)本放在鏡臺(tái)上,一定使有蓋玻片的一面朝上,切不可放反,用推片器彈簧夾夾住,然后旋轉(zhuǎn)推片器螺旋,將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。
(4)調(diào)節(jié)焦距:以左手按逆時(shí)針方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器,使鏡臺(tái)緩慢地上升至物鏡距標(biāo)本片約5毫米處,應(yīng)注意在上升鏡臺(tái)時(shí),切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺(tái)上升,以免上升過多,造成鏡頭或標(biāo)本片的損壞。然后,兩眼同時(shí)睜開,用左眼在目鏡上觀察,左手順時(shí)針方向緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器,使鏡臺(tái)緩慢下降,直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。
如果物象不在視野中心,可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心(注意移動(dòng)玻片的方向與視野物象移動(dòng)的方向是相反的)。如果視野內(nèi)的亮度不合適,可通過升降集光器的位置或開閉光圈的大小來調(diào)節(jié),如果在調(diào)節(jié)焦距時(shí),鏡臺(tái)下降已超過工作距離(>5.40mm)而未見到物象,說明此次操作失敗,則應(yīng)重新操作,切不可心急而盲目地上升鏡臺(tái)。
2.高倍鏡的使用方法
(1)選好目標(biāo):一定要先在低倍鏡下把需進(jìn)一步觀察的部位調(diào)到中心,同時(shí)把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度,才能進(jìn)行高倍鏡的觀察。
(2)轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,調(diào)換上高倍鏡頭,轉(zhuǎn)換高倍鏡時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)速度要慢,并從側(cè)面進(jìn)行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片),如高倍鏡頭碰到玻片,說明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好,應(yīng)重新操作。
(3)調(diào)節(jié)焦距:轉(zhuǎn)換好高倍鏡后,用左眼在目鏡上觀察,此時(shí)一般能見到一個(gè)不太清楚的物象,可將細(xì)調(diào)節(jié)器的螺旋逆時(shí)針移動(dòng)約0.5-1圈,即可獲得清晰的物象(切勿用粗調(diào)節(jié)器?。?/p>
如果視野的亮度不合適,可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié),如果需要更換玻片標(biāo)本時(shí),必須順時(shí)針(切勿轉(zhuǎn)錯(cuò)方向)轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡臺(tái)下降,方可取下玻片標(biāo)本。
3.生物顯微鏡油鏡的使用方法
(1)在使用油鏡之前,必須先經(jīng)低、高倍鏡觀察,然后將需進(jìn)一步放大的部分移到視野的中心。
(2)將集光器上升到最高位置,光圈開到最大。
(3)轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使高倍鏡頭離開通光孔,在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)油鏡,在轉(zhuǎn)換油鏡時(shí),從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離,使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。
(4)用左眼觀察目鏡,并慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。
如果不出現(xiàn)物象或者目標(biāo)不理想要重找,在加油區(qū)之外重找時(shí)應(yīng)按:低倍→高倍→油鏡程序。在加油區(qū)內(nèi)重找應(yīng)按:低倍→油鏡程序,不得經(jīng)高倍鏡,以免油沾污鏡頭。
(5)油鏡使用完畢,先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標(biāo)本上的香柏油擦去,然后再用干擦鏡紙擦干凈。
(一) 顯微鏡的構(gòu)造及各部名稱 關(guān)于顯微鏡的結(jié)構(gòu)與使用方法已于生物學(xué)和組織胚胎學(xué)課程中學(xué)過,在寄生蟲學(xué)的學(xué)習(xí)中,要求進(jìn)一步熟練使用。
顯微鏡的構(gòu)造及各部名稱見圖1。 (二) 顯微鏡的使用 利用自然光源鏡檢時(shí),最好用朝北的光源,不宜3采用直射陽(yáng)光;利用人工光源時(shí),宜用日光燈的光源。
鏡檢時(shí)身體要正對(duì)實(shí)習(xí)臺(tái),采取端正的姿態(tài),兩眼自然張開,左眼觀察標(biāo)本,右眼觀察記錄及繪圖,同時(shí)左手調(diào)節(jié)焦距,使物象清晰并移動(dòng)標(biāo)本視野。右手記錄、繪圖。
鏡檢時(shí)載物臺(tái)不可傾斜,因?yàn)楫?dāng)在五套載物臺(tái)傾斜時(shí),液體或油易流出,既損壞了標(biāo)本,又污染載物臺(tái),也影響檢查結(jié)果。 圖1 顯微鏡 鏡檢時(shí)應(yīng)將標(biāo)本按一定方向移動(dòng)視野,直至整個(gè)標(biāo)本觀察完畢,以便不漏檢,不重復(fù)。
顯微鏡的重光為對(duì)光,接物鏡的轉(zhuǎn)換及光線的調(diào)節(jié)。觀察寄生蟲標(biāo)本時(shí),光線調(diào)節(jié)甚為重要。
因?yàn)樗^察的標(biāo)本如蟲卵、包囊等,均為自然光狀態(tài)的物體,有大有小,色澤有深有淺,有的無色透明,而低倍、高倍接物鏡轉(zhuǎn)換較多,故須隨著鏡檢時(shí)對(duì)不同標(biāo)本和要求,需要隨時(shí)調(diào)節(jié)焦距和光線,這樣才能使觀察的物象清晰。在一般情況下,染色標(biāo)本光線宜強(qiáng),無色或未染色標(biāo)本光線宜弱;低倍鏡觀察光線宜弱,高倍鏡觀察光線宜強(qiáng)。
1. 對(duì)光: (1)將低倍鏡轉(zhuǎn)至鏡筒下方與鏡筒成一直線。 (2)撥動(dòng)反光鏡,調(diào)節(jié)至視野最亮無陰影。
反光鏡有平、凹兩面,光源強(qiáng)時(shí)用平面,較暗時(shí)用凹面,需要強(qiáng)光時(shí),將聚光器提高,光圈放大;需要弱光時(shí),將聚光器降低,或光圈適當(dāng)縮小。 (3)將待觀察的標(biāo)本置載物臺(tái)上,轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡筒下降至接物鏡接近標(biāo)本。
于轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器的同時(shí),須俯身在鏡旁仔細(xì)觀察接物鏡與標(biāo)本之間的距離。 (4)左眼于接目鏡觀察,同時(shí)左手轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié),使鏡筒徐徐上升以調(diào)節(jié)焦距,使視野內(nèi)的物象看到上時(shí)即停,再調(diào)微調(diào)節(jié)器,至標(biāo)本清晰為止。
2. 接物鏡的使用及光線的調(diào)節(jié): 顯微鏡一般具有三個(gè)接物鏡,即低倍、高倍及油鏡,固定于接物鏡轉(zhuǎn)換盤孔中。觀察標(biāo)本時(shí),先使用低倍接物鏡,此時(shí),視野較大,標(biāo)本較易查出,但放大倍數(shù)較?。ㄒ话惴糯?00倍),較小的物體不易觀察其結(jié)構(gòu)。
高倍接物鏡放大的倍數(shù)較大(一般放大400倍),能觀察微小的物體或結(jié)構(gòu)。 寄生蟲的蠕蟲卵,微絲蚴,原蟲的滋養(yǎng)體及包囊,昆蟲的幼蟲,均使用低、高倍鏡。
組織細(xì)胞內(nèi)的原蟲,則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀察,如在低倍鏡下不能準(zhǔn)確鑒定所見的物體或其內(nèi)部構(gòu)造時(shí),則轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。
使用油鏡觀察,一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進(jìn)行鏡檢觀察。 3. 低倍、高倍、油鏡頭的識(shí)別: (1)標(biāo)明放大倍數(shù)10*,40*,100*,或10/0.25,40/0.65,100/1.30。
(2)低倍鏡最短,高倍鏡較長(zhǎng),油鏡最長(zhǎng)。 (3)鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大,高倍鏡較大,油鏡最小。
(4)油鏡頭上常刻有黑色環(huán)圈,或“油”字。 4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法: (1)光線對(duì)好后,移動(dòng)推進(jìn)器尋找需要觀察的標(biāo)本。
(2)如標(biāo)本的體積較大,不能清楚查見其構(gòu)造因而不能確認(rèn)時(shí),則將標(biāo)本移至視野中央,再旋轉(zhuǎn)高倍接物鏡于鏡筒下方。 (3)旋轉(zhuǎn)微調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。
(4)調(diào)節(jié)聚光器及光圈,使視野內(nèi)的物象達(dá)到最清晰的程度。 5. 油鏡的使用方法: (1)原理:使用油鏡觀察時(shí),需加香柏油,因?yàn)橛顽R需要進(jìn)入鏡頭的光線多,但油鏡的透氣孔最小,這樣進(jìn)入的光線就少,物體不易看清楚。
同時(shí)又因自玻片透過的光線,由于介質(zhì)(玻片-空氣-接物鏡)密度(玻片:n=1.52,空氣:n=1.0)不同而發(fā)生了折射散光,因此射入鏡頭的光線就更少,物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質(zhì)如香柏油,加于標(biāo)本與玻片之間,使光線不通過空氣,這樣射入鏡頭的光線就較多,物象就看得清楚(圖2)。
(2)油鏡的使用: a.將光線調(diào)至最強(qiáng)程度(聚光器提高,光圈全部開放)。 b.轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡筒上升,滴香柏油1小滴(不要過多,不要涂開)于接物鏡正下方標(biāo)本上。
c.轉(zhuǎn)動(dòng)接物鏡轉(zhuǎn)換盤,使油鏡頭于鏡筒下方。 d.俯身鏡旁側(cè)面在肉眼的觀察下,轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內(nèi),輕輕接觸玻片為止。
e.慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器,使油鏡頭徐徐上升至見到標(biāo)本的物象為止。 f.轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)節(jié)器,使視野物象達(dá)到最清晰的程度。
g.左手徐徐移動(dòng)推進(jìn)器,并轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)節(jié)器以觀察標(biāo)本。 h.標(biāo)本觀察完畢后,轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器將鏡筒升起,取下標(biāo)本玻片。
立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。 6. 注意事項(xiàng): (1)使用顯微鏡之前,應(yīng)熟悉顯微鏡的各部名稱及使用方法,特別應(yīng)掌握識(shí)別三種接物鏡之特征。
(2)寄生蟲學(xué)實(shí)習(xí)中所觀察的標(biāo)本,大多數(shù)為無色和顏色較淺,因此必須注意光線的調(diào)節(jié)。 (3)新鮮標(biāo)本觀察時(shí),須加蓋玻片,以免標(biāo)本因蒸發(fā)而干燥變形或污染侵蝕接物鏡,同時(shí)可使標(biāo)本表面勻平,光線得以集中,有利于觀察。
(三) 顯微鏡的保養(yǎng) 圖3 加用蓋玻片后,標(biāo)本表面勻平,光線得以集中,便于檢查示意圖1.顯微鏡在從木箱中取出或裝箱時(shí),右手緊握鏡臂,左手穩(wěn)托鏡座,輕輕取出。不要只用一只手提取,以防顯微鏡墜落,然后輕輕放在實(shí)習(xí)臺(tái)上或裝 入木箱內(nèi)。
2.顯微鏡放到實(shí)習(xí)臺(tái)上時(shí),先放鏡座。
應(yīng)注意事項(xiàng): ①保護(hù)好顯微鏡的鏡頭; ②旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋不要用力過猛; ③載物臺(tái)要保持清潔; ④使用低倍鏡觀察; ⑤物鏡不要碰到載玻片以免打碎載玻片; ⑥如何移動(dòng)玻片來選擇較好的觀察部位; ⑦如何區(qū)分蓋玻片上的臟東西以及氣泡。
詳細(xì)步驟: 關(guān)鍵是對(duì)光和觀察 轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔; 轉(zhuǎn)動(dòng)遮光器使最大的光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔, 再注視目鏡 手調(diào)節(jié)反光嘗矗佰匪脂睹拌色飽姬鏡 使視野呈雪白色 把標(biāo)本放上去 轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋使鏡筒下降 然后就邊注視顯微鏡視野內(nèi) 邊調(diào)粗準(zhǔn)焦螺旋 直到視野出現(xiàn)物象 再微調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 使物象更清晰!。
1、條件許可情況下,建議試驗(yàn)室應(yīng)具備三防條件:防震、防潮、防塵;電源:220V±10%,50HZ;溫度:0°C—40°C。
2、亮度調(diào)整切忌忽大忽小,也不要過亮,影響燈泡的使用壽命,同時(shí)也有損視力。
3、所有(功能)切換,動(dòng)作要輕,要到位。
4、關(guān)機(jī)時(shí)要將亮度調(diào)到最小。
5、調(diào)焦時(shí)注意不要使物鏡碰到試樣,以免劃傷物鏡。
6、當(dāng)載物臺(tái)墊片圓孔中心的位置遠(yuǎn)離物鏡中心位置時(shí)不要切換物鏡,以免劃傷物鏡。
7、非專業(yè)人員不要調(diào)整照明系統(tǒng)(燈絲位置燈),以免影響成像質(zhì)量。
8、更換鹵素?zé)魰r(shí)要注意高溫,以免灼傷;注意不要用手直接接觸鹵素?zé)舻牟Aw。
9、關(guān)機(jī)不使用時(shí),將物鏡通過調(diào)焦機(jī)構(gòu)調(diào)整到最低狀態(tài)。
10、關(guān)機(jī)不使用時(shí),不要立即該蓋防塵罩,待冷卻后再蓋,注意防火。
顯微鏡使用時(shí)的注意事項(xiàng)
1.取送方法要正確。因?yàn)榉垂忡R是通過鏡柄插放在鏡臂下面的,目鏡是插放在鏡筒上端的,所以,它們很容易滑落而損壞。取送顯微鏡時(shí)一定要右手握住鏡臂,左手托住鏡座,在任何情況下都不準(zhǔn)用一只手提著顯微鏡。另外,也不準(zhǔn)許學(xué)生取下反光鏡和目鏡亂照亂摸。
2.鏡頭的保護(hù)。目鏡和物鏡平時(shí)放在顯微鏡箱內(nèi)的專用的盒內(nèi)。上實(shí)驗(yàn)課期間,為了防止落上灰塵,要制作專用的塑料袋或布袋,課間時(shí)要隨時(shí)罩好。鏡頭臟了,只能用專用的擦鏡紙擦拭,擦?xí)r要順著一個(gè)方向擦。如果擦拭不凈,最好蘸一點(diǎn)二甲苯繼續(xù)擦。注意,決不能把鏡頭放到二甲苯中浸泡,這樣會(huì)使鏡頭開膠,鏡片脫落。
3.粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋的使用和防止鏡筒下滑。一般地說,粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋各轉(zhuǎn)動(dòng)一周,可以使鏡筒分別移動(dòng)10 mm和0.1 mm。要使鏡筒下降時(shí),一定要用眼睛直接看著物鏡,使鏡筒緩緩下降。否則,很容易砸壞物鏡和玻片標(biāo)本。
顯微鏡使用時(shí)間過長(zhǎng),鏡筒容易出現(xiàn)下滑現(xiàn)象。如果情況不太嚴(yán)重,教師可以進(jìn)行如下簡(jiǎn)易維修:老式顯微鏡鏡臂的上端有兩個(gè)控制鏡筒松緊的螺絲,只要順時(shí)針擰動(dòng)螺絲,鏡筒就擰緊了;對(duì)于國(guó)產(chǎn)的新式顯微鏡,鏡筒的松緊是通過兩個(gè)粗準(zhǔn)焦螺旋來調(diào)節(jié)的。左手握緊左側(cè)粗準(zhǔn)焦螺旋,右手順時(shí)針方向擰緊粗準(zhǔn)焦螺旋,鏡筒就擰緊了。如果情況嚴(yán)重,要及時(shí)送到修理部門維修。
4.轉(zhuǎn)換器的使用。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器時(shí),不要用手指扳著物鏡。這樣時(shí)間長(zhǎng)了,容易使物鏡鏡頭松動(dòng),改變焦距,影響觀察的清晰度。正確的方法是手指握準(zhǔn)轉(zhuǎn)換器的邊緣進(jìn)行轉(zhuǎn)動(dòng)。
5.制作目鏡上的指示針。在演示或考察學(xué)生觀察效果時(shí),最好用帶有指示針的目鏡。簡(jiǎn)易的做法是:輕輕拆開目鏡,將一根短頭發(fā)的一端用膠水粘在目鏡內(nèi)里的邊緣,另一端指向目鏡圓心的附近。觀察時(shí),輕輕地轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡,指示針就能夠指出視野內(nèi)的不同部位。
應(yīng)注意事項(xiàng):①保護(hù)好顯微鏡的鏡頭;②旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋不要用力過猛;③載物臺(tái)要保持清潔;④使用低倍鏡觀察;⑤物鏡不要碰到載玻片以免打碎載玻片;⑥如何移動(dòng)玻片來選擇較好的觀察部位;⑦如何區(qū)分蓋玻片上的臟東西以及氣泡。
詳細(xì)步驟:關(guān)鍵是對(duì)光和觀察轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔;轉(zhuǎn)動(dòng)遮光器使最大的光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔,再注視目鏡 手調(diào)節(jié)反光鏡 使視野呈雪白色把標(biāo)本放上去 轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋使鏡筒下降然后就邊注視顯微鏡視野內(nèi) 邊調(diào)粗準(zhǔn)焦螺旋直到視野出現(xiàn)物象 再微調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 使物象更清晰!。
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