細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)方法(細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)方法)

1.細(xì)菌學(xué)有哪些檢驗(yàn)方法

細(xì)菌學(xué)的檢驗(yàn)方法有： 1.涂片鏡檢 將病料涂于清潔無(wú)油污的載玻片上，干燥后在酒精燈火焰上固 定，選用單染色法（如美藍(lán)染色法）、革蘭氏染色法、抗酸染色法或其他特殊染色法染色鏡檢，根據(jù)所觀察到的細(xì) 菌形態(tài)特征，作出初步診斷或確定進(jìn)一步檢驗(yàn)的步驟。

2.分離培養(yǎng) 根據(jù)所懷疑傳染病病原菌的特點(diǎn)，將病料接種于適宜的細(xì)菌培 養(yǎng)基上，在一定溫度（常為37°C）下進(jìn)行培養(yǎng)，獲得純 培養(yǎng)苗后，再用特殊的培養(yǎng)基培養(yǎng)，進(jìn)行細(xì)菌的形態(tài)學(xué)、培養(yǎng)特 征、生化特性、致病力和抗原特性鑒定。 3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 用滅菌生理鹽水將病料做成1 : 10懸液，或利用分離培養(yǎng)獲得的細(xì)菌液感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔等。

感染方法可用皮下、肌內(nèi)、腹腔、靜脈或腦內(nèi)注射。感染后按常規(guī)隔離 伺養(yǎng)管理，注意觀察，有時(shí)還需對(duì)某種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物測(cè)量體溫；如有死亡，應(yīng)立即進(jìn)行剖檢及細(xì)菌學(xué)檢查。

2.細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)基本技術(shù)有哪些

1.涂片鏡檢

將病料涂于清潔無(wú)油污的載玻片上，干燥后在酒精燈火焰上固 定，選用單染色法（如美藍(lán)染色法）、革蘭氏染色法、抗酸染色法或其他特殊染色法染色鏡檢，根據(jù)所觀察到的細(xì) 菌形態(tài)特征，作出初步診斷或確定進(jìn)一步檢驗(yàn)的步驟。

2.分離培養(yǎng)

根據(jù)所懷疑傳染病病原菌的特點(diǎn)，將病料接種于適宜的細(xì)菌培 養(yǎng)基上，在一定溫度（常為37°C）下進(jìn)行培養(yǎng)，獲得純 培養(yǎng)苗后，再用特殊的培養(yǎng)基培養(yǎng)，進(jìn)行細(xì)菌的形態(tài)學(xué)、培養(yǎng)特 征、生化特性、致病力和抗原特性鑒定。

3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

用滅菌生理鹽水將病料做成1 : 10懸液，或利用分離培養(yǎng)獲得的細(xì)菌液感染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔等。感染方法可用皮下、肌內(nèi)、腹腔、靜脈或腦內(nèi)注射。感染后按常規(guī)隔離 伺養(yǎng)管理，注意觀察，有時(shí)還需對(duì)某種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物測(cè)量體溫；如有死亡，應(yīng)立即進(jìn)行剖檢及細(xì)菌學(xué)檢查。

3.細(xì)菌鑒定辦法有哪些,詳細(xì)些哦~~

一 淀粉水解試驗(yàn) （一）實(shí)驗(yàn)原理 細(xì)菌對(duì)大分子的淀粉、蛋白質(zhì)和脂肪不能直接利用，必須靠產(chǎn)生的胞外酶，如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶將大分子物質(zhì)分解。

胞外酶能分泌擴(kuò)散到細(xì)胞外，將物質(zhì)分解成小單位如糖、氨基酸、甘油與脂肪酸。這些小單位的物質(zhì)能被細(xì)菌吸收和利用。

水解過(guò)程可通過(guò)底物的變化來(lái)證明，如細(xì)菌水解淀粉的區(qū)域，用碘測(cè)定不再產(chǎn)生藍(lán)色；水解明膠可觀察到明膠被液化；脂肪水解后產(chǎn)生脂肪酸改變培養(yǎng)基的pH，其中的中性紅指示劑使培養(yǎng)基從淡紅色變?yōu)樯罴t色。（二）實(shí)驗(yàn)方法 將淀粉培養(yǎng)基溶化后，冷至45℃左右，以無(wú)菌操作制成平板。

取18-24h的純培養(yǎng)物點(diǎn)于平板上，每皿可點(diǎn)種3-5個(gè)菌株，適溫培養(yǎng)2-4d，形成菌落后，在平板上滴加盧戈氏碘液，以鋪滿菌落周?chē)鸀槎?，平板成藍(lán)色。如果菌落周?chē)袩o(wú)色透明圈出現(xiàn)，說(shuō)明淀粉已經(jīng)被水解，實(shí)驗(yàn)為陽(yáng)性，否則為陰性。

透明圈的大小一般說(shuō)明水解淀粉的能力。（三）實(shí)驗(yàn)試劑的配制 肉湯蛋白胨瓊脂成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂17g，蒸餾水1000mL,pH7.2。

淀粉培養(yǎng)基制法：在肉湯蛋白胨瓊脂中添加0.2%的可溶性淀粉，校正pH值至7.6，分裝三角瓶，121℃ 20min滅菌備用。盧戈氏（Lugol）碘液：碘片1g，碘化鉀2g，蒸餾水300ml，先將碘化鉀溶解在少量水中，再將碘片溶解在碘化鉀溶液中，混勻，定容。

二 糖發(fā)酵試驗(yàn)（一）實(shí)驗(yàn)原理 單糖發(fā)酵是將葡萄糖，乳糖或麥芽糖等分別加入蛋白胨水培養(yǎng)基內(nèi)，使其最終濃度為0.75-1%。并加入一定量酚紅指示劑及小倒管，制成單糖發(fā)酵管，接種細(xì)菌經(jīng)37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)，若能分解糖產(chǎn)酸則酚紅指示劑由紅變黃，若能分解甲酸有CO2和H2等氣體形成，小倒管內(nèi)則聚集有氣泡；不分解，則指示劑不變色。

（二）實(shí)驗(yàn)材料 1.菌種：大腸桿菌，傷寒桿菌18-24小時(shí)瓊脂斜面培養(yǎng)物。 2.培養(yǎng)基：葡萄糖發(fā)酵管，乳糖發(fā)酵管等。

（三）實(shí)驗(yàn)方法1.將傷寒桿菌，大腸桿菌按照液體接種方法分別接種于葡萄糖及乳糖發(fā)酵管內(nèi)。 2.置37℃孵箱培養(yǎng)18-24小時(shí)。

3.觀察結(jié)果：由于一些細(xì)菌能分解某種糖類(lèi)產(chǎn)酸，所以培養(yǎng)基中pH下降到7.0以下，在酚紅指示劑的顯示下，培養(yǎng)基顏色由紅變黃。產(chǎn)酸者以“+”表示，如果同時(shí)產(chǎn)生氣體，則培養(yǎng)基中小倒管內(nèi)有氣泡出現(xiàn)，此乃產(chǎn)酸又產(chǎn)氣，以“⊕”表示，不分解，則指示劑不變色，用“-”表示。

（四）實(shí)驗(yàn)結(jié)果 傷寒桿菌 大腸桿菌 葡萄糖 + ⊕ 乳 糖 - ⊕ （五）實(shí)驗(yàn)試劑的配制1.單糖發(fā)酵管的制備： 成分：蛋白胨水培養(yǎng)基 100ml ,0.2%酚紅 1ml ，所需糖（葡萄糖或乳糖）0.75-1g 制法： （1）將上述成分溶化，混勻分裝于內(nèi)含有倒置小玻璃管的小試管中，每管約2ml，加塞。 （2）小倒管排氣，滅菌（8-10磅，20-30分鐘），貯存?zhèn)溆谩?/p>

用途：供單糖發(fā)酵試驗(yàn)用。 2.0.2%酚紅配制法 酚紅（phenol red）0.2g ,0.lmol/LNaOH 8ml ，蒸餾水 92ml 將酚紅入研缽徐徐加入0.lmol/LNaOH研磨，再補(bǔ)足蒸餾水即成。

若需長(zhǎng)時(shí)間保存，可高壓滅菌后貯存?zhèn)溆谩?三 甲基紅（M.R）試驗(yàn)（一）實(shí)驗(yàn)原理 某些細(xì)菌如大腸桿菌等分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，繼而分解為甲酸、乙酸、乳酸等，使培養(yǎng)基pH值降至4.5以下，加入甲基紅指示劑呈紅色，此為陽(yáng)性反應(yīng)；若產(chǎn)酸量少或產(chǎn)生的酸進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為醇、醛、氣體和水等，則培養(yǎng)基的酸堿度仍在pH 6.2以上，加入甲基紅指示劑呈現(xiàn)黃色，為陰性反應(yīng)。

（二）實(shí)驗(yàn)材料1. 菌種：大腸桿菌，產(chǎn)氣桿菌18-24h瓊脂斜面培養(yǎng)物。 2. 培養(yǎng)基：葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基。

3. 試劑：甲基紅試劑。 （三）實(shí)驗(yàn)方法1. 分別將大腸桿菌，產(chǎn)氣桿菌接種于兩支葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中。

2. 置37℃培養(yǎng)2-3天取出，分別滴加甲基紅試劑2-3滴，混勻，觀察結(jié)果。 （四）實(shí)驗(yàn)結(jié)果 大腸桿菌：+，產(chǎn)氣桿菌：-。

（五）實(shí)驗(yàn)試劑的配制1.甲基紅試劑的配制 甲基紅 0.04g, 95%酒精 60ml ， 蒸餾水 40ml 。先使甲基紅溶解于酒精中，再加入蒸餾水，混合，搖勻即成。

2.葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)物 成分：蛋白胨5g 葡萄糖5g 制法： （1）將上述成分溶解于蒸餾水中。 （2）調(diào)節(jié)pH至7.6，用濾紙過(guò)濾除渣。

（3）分裝中試管，每管約3-4ml，滅菌后備用。 用途：供甲基紅及V-P試驗(yàn)用。

四 產(chǎn)吲哚（indole）試驗(yàn)（一）實(shí)驗(yàn)原理 某些細(xì)菌如大腸桿菌，變形桿菌等具有色氨酸酶，能分解蛋白胨水培養(yǎng)基中的色氨酸，產(chǎn)生靛基質(zhì)（無(wú)色吲哚），再與歐立希試劑（對(duì)二甲基氨基苯甲醛）反應(yīng)，形成紅色化合物—玫瑰吲哚，即為陽(yáng)性反應(yīng)。 （二）實(shí)驗(yàn)材料1. 菌種：大腸桿菌，傷寒桿菌18-24小時(shí)瓊脂斜面培養(yǎng)物。

2. 培養(yǎng)基：蛋白胨水培養(yǎng)基。 3. 試劑，歐立希（Ehrlich）試劑（對(duì)二甲基氨基苯甲醛） （三）實(shí)驗(yàn)方法1. 分別將大腸桿菌，傷寒桿菌接種于兩支蛋白胨水培養(yǎng)基中。

2. 置37℃培養(yǎng)2-3天后，每管沿管壁各加歐立希試劑0.5-1ml于培養(yǎng)液面上，待1-2分鐘后觀察結(jié)果：在交界面出現(xiàn)玫瑰紅色環(huán)即為吲哚試驗(yàn)陽(yáng)性，無(wú)紅色環(huán)即為陰性。 （四）實(shí)驗(yàn)結(jié)果 大腸桿菌：+ ；傷寒桿菌：- 。

（五）實(shí)驗(yàn)試劑的配制1.蛋白胨水培養(yǎng)基的制備 成分：蛋白胨10g 氯化鈉5g 蒸餾水1000ml 制法： （1）先用少量蒸餾水將蛋白胨和氯化鈉相混合溶解，再加足蒸餾水量。 。

4.病原微生物中細(xì)菌常見(jiàn)檢測(cè)方法有哪些

細(xì)菌 [what]什么是細(xì)菌？細(xì)菌（英文：germs;bacteria）隸屬生物學(xué)一類(lèi)，是在自然界分布最廣、個(gè)體數(shù)量最多的有機(jī)體，是大自然物質(zhì)循環(huán)的主要參與者。

細(xì)菌主要由細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)體等部分構(gòu)成，有的細(xì)菌還有夾膜、鞭毛、菌毛等特殊結(jié)構(gòu)。絕大多數(shù)細(xì)菌的直徑大小在0.5~5μm之間。

可根據(jù)形狀分為三類(lèi)，即：球菌、桿菌和螺旋菌（包括弧形菌）。 還有一種利用細(xì)菌的生活方式來(lái)分類(lèi)，即可分為兩大類(lèi)：腐生生活與寄生生活。

（一）細(xì)胞壁 細(xì)胞壁厚度因細(xì)菌不同而異，一般為15-30nm。主要成分是肽聚糖，由n-乙酰葡糖胺和n-乙酰胞壁酸構(gòu)成雙糖單元，以β（1-4）糖苷鍵連接成大分子。

n-乙酰胞壁酸分子上有四肽側(cè)鏈，相鄰聚糖纖維之間的短肽通過(guò)肽橋（革蘭氏陽(yáng)性菌）或肽鍵（革蘭氏陰性菌）橋接起來(lái)，形成了肽聚糖片層，像膠合板一樣，粘合成多層。 肽聚糖中的多糖鏈在各物種中都一樣，而橫向短肽鏈卻有種間差異。

革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁厚約20~80nm，有15-50層肽聚糖片層，每層厚1nm，含20-40%的磷壁酸（teichoic acid），有的還具有少量蛋白質(zhì)。革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁厚約10nm，僅2-3層肽聚糖，其他成分較為復(fù)雜，由外向內(nèi)依次為脂多糖、細(xì)菌外膜和脂蛋白。

此外，外膜與細(xì)胞之間還有間隙。 肽聚糖是革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁的主要成分，凡能破壞肽聚糖結(jié)構(gòu)或抑制其合成的物質(zhì)，都有抑菌或殺菌作用。

如溶菌酶是n-乙酰胞壁酸酶，青霉素抑制轉(zhuǎn)肽酶的活性，抑制肽橋形成。 細(xì)菌細(xì)胞壁的功能包括：保持細(xì)胞外形；抑制機(jī)械和滲透損傷（革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁能耐受20kg/cm2的壓力）；介導(dǎo)細(xì)胞間相互作用（侵入宿主）；防止大分子入侵；協(xié)助細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和分裂。

脫壁的細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)菌原生質(zhì)體（bacterial protoplast）或球狀體（spheroplast，因脫壁不完全），脫壁后的細(xì)菌原生質(zhì)體，生存和活動(dòng)能力大大降低。 （二）細(xì)胞膜 是典型的單位膜結(jié)構(gòu)，厚約8~10nm，外側(cè)緊貼細(xì)胞壁，某些革蘭氏陰性菌還具有細(xì)胞外膜。

通常不形成內(nèi)膜系統(tǒng)，除核糖體外，沒(méi)有其它類(lèi)似真核細(xì)胞的細(xì)胞器，呼吸和光合作用的電子傳遞鏈位于細(xì)胞膜上。某些行光合作用的原核生物（藍(lán)細(xì)菌和紫細(xì)菌），質(zhì)膜內(nèi)褶形成結(jié)合有色素的內(nèi)膜，與捕光反應(yīng)有關(guān)。

某些革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌質(zhì)膜內(nèi)褶形成小管狀結(jié)構(gòu)，稱(chēng)為中膜體（mesosome）或間體（圖3-11），中膜體擴(kuò)大了細(xì)胞膜的表面積，提高了代謝效率，有擬線粒體（chondroid）之稱(chēng)，此外還可能與dna的復(fù)制有關(guān)。 （三）細(xì)胞質(zhì)與核質(zhì)體 細(xì)菌和其它原核生物一樣，沒(méi)有核膜，dna集中在細(xì)胞質(zhì)中的低電子密度區(qū)，稱(chēng)核區(qū)或核質(zhì)體（nuclear body）。

細(xì)菌一般具有1-4個(gè)核質(zhì)體，多的可達(dá)20余個(gè)。核質(zhì)體是環(huán)狀的雙鏈dna分子，所含的遺傳信息量可編碼2000~3000種蛋白質(zhì)，空間構(gòu)建十分精簡(jiǎn)，沒(méi)有內(nèi)含子。

由于沒(méi)有核膜，因此dna的復(fù)制、rna的轉(zhuǎn)錄與蛋白的質(zhì)合成可同時(shí)進(jìn)行，而不像真核細(xì)胞那樣這些生化反應(yīng)在時(shí)間和空間上是嚴(yán)格分隔開(kāi)來(lái)的。 每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞約含5000~50000個(gè)核糖體，部分附著在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，大部分游離于細(xì)胞質(zhì)中。

細(xì)菌核糖體的沉降系數(shù)為70s，由大亞單位（50s）與小亞單位（30s）組成，大亞單位含有23srrna,5srrna與30多種蛋白質(zhì)，小亞單位含有16srrna與20多種蛋白質(zhì)。30s的小亞單位對(duì)四環(huán)素與鏈霉素很敏感，50s的大亞單位對(duì)紅霉素與氯霉素很敏感。

細(xì)菌核區(qū)dna以外的，可進(jìn)行自主復(fù)制的遺傳因子，稱(chēng)為質(zhì)粒（plasmid）。質(zhì)粒是裸露的環(huán)狀雙鏈dna分子，所含遺傳信息量為2~200個(gè)基因，能進(jìn)行自我復(fù)制，有時(shí)能整合到核dna中去。

質(zhì)粒dna在遺傳工程研究中很重要，常用作基因重組與基因轉(zhuǎn)移的載體。 胞質(zhì)顆粒是細(xì)胞質(zhì)中的顆粒，起暫時(shí)貯存營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用，包括多糖、脂類(lèi)、多磷酸鹽等。

（四）其他結(jié)構(gòu) 許多細(xì)菌的最外表還覆蓋著一層多糖類(lèi)物質(zhì)，邊界明顯的稱(chēng)為莢膜（capsule），如肺炎球菌，邊界不明顯的稱(chēng)為粘液層（slime layer），如葡萄球菌。莢膜對(duì)細(xì)菌的生存具有重要意義，細(xì)菌不僅可利用莢膜抵御不良環(huán)境；保護(hù)自身不受白細(xì)胞吞噬；而且能有選擇地粘附到特定細(xì)胞的表面上，表現(xiàn)出對(duì)靶細(xì)胞的專(zhuān)一攻擊能力。

例如，傷寒沙門(mén)桿菌能專(zhuān)一性地侵犯腸道淋巴組織。細(xì)菌莢膜的纖絲還能把細(xì)菌分泌的消化酶貯存起來(lái)，以備攻擊靶細(xì)胞之用。

鞭毛是某些細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官，由一種稱(chēng)為鞭毛蛋白（flagellin）的彈性蛋白構(gòu)成，結(jié)構(gòu)上不同于真核生物的鞭毛。細(xì)菌可以通過(guò)調(diào)整鞭毛旋轉(zhuǎn)的方向（順和逆時(shí)針）來(lái)改變運(yùn)動(dòng)狀態(tài)。

菌毛是菌體表面極其的蛋白纖細(xì)，須用電鏡觀察。特點(diǎn)是：細(xì)、短、直、硬、多，菌毛與細(xì)菌運(yùn)動(dòng)無(wú)關(guān)，根據(jù)形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能，可分為普通菌毛和性菌毛兩類(lèi)。

前者與細(xì)菌吸附和侵染宿主有關(guān)，后者為中空管子，與傳遞遺傳物質(zhì)有關(guān)。 （五）繁殖 細(xì)菌一二分裂的方式繁殖，某些細(xì)菌處于不利的環(huán)境，或耗盡營(yíng)養(yǎng)時(shí)，形成內(nèi)生孢子，又稱(chēng)芽孢，是對(duì)不良環(huán)境有強(qiáng)抵抗力的休眠體，由于芽胞在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)形成，故常稱(chēng)為內(nèi)生孢子。

芽孢的生命力非常頑強(qiáng)，有些湖底沉積土中的芽抱桿茵經(jīng)500-1000年后仍有活力，肉毒梭菌的芽孢在ph 7.0時(shí)能耐受100℃煮沸5-9.5小。

5.細(xì)菌檢測(cè)最簡(jiǎn)單的方法

原發(fā)布者：龍?jiān)雌诳W(wǎng)

目前有哪種微生物測(cè)試方法能夠在6~8個(gè)小時(shí)內(nèi)顯示食品和食品生產(chǎn)環(huán)境清潔度的微生物水平？食品和飲料生產(chǎn)公司的答案是令人失望的：沒(méi)有！細(xì)菌總數(shù)、大腸菌群以及大腸桿菌平板計(jì)數(shù)通?？梢詫?duì)食品樣品以及表面處理環(huán)境的微生物水平進(jìn)行評(píng)估，然而檢測(cè)結(jié)果需要在24~72小時(shí)之后獲得。而采用顯色培養(yǎng)基進(jìn)行的特殊細(xì)菌測(cè)試，獲得檢測(cè)結(jié)果的時(shí)間會(huì)更長(zhǎng)，如果采用外部實(shí)驗(yàn)室的方法，那么從樣品收集到獲得檢測(cè)結(jié)果要在3~5天。盡管快速自動(dòng)的檢測(cè)系統(tǒng)是可行的，但是這些檢測(cè)方法也需要一天以上的時(shí)間，且對(duì)于大多數(shù)的公司來(lái)講檢測(cè)費(fèi)用較為昂貴，檢測(cè)方法也較為復(fù)雜。相比之下，食品公司一般會(huì)采用外部實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物檢測(cè)。受方法的科學(xué)局限、靈敏度的約束、分析的復(fù)雜程度以及高昂費(fèi)用等因素的影響，盡管面對(duì)需要盡快獲得產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果的情況，但大多數(shù)的食品飲料生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)者也不得不采用延遲獲得檢測(cè)結(jié)果的技術(shù)對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)。目前研發(fā)出一種被AOAC（美國(guó)分析化學(xué)家協(xié)會(huì)）認(rèn)證的，操作十分簡(jiǎn)單，能夠在當(dāng)天獲得產(chǎn)品指示微生物如大腸菌群、大腸桿菌以及總需氧微生物的檢測(cè)結(jié)果的新的檢測(cè)平臺(tái)，這種新型的檢測(cè)平臺(tái)被稱(chēng)為

6.細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查常用的方法有什么

細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查方法：常用染色方法

1.美藍(lán)染色法

在已干燥、固定好的抹片上，滴加適量的美藍(lán)染色液，經(jīng)1一2分鐘，水洗，干后鏡檢，結(jié)果是細(xì)菌呈藍(lán)色。

2.稀釋石炭酸復(fù)紅染色法

染色方法同美藍(lán)染色法，結(jié)果是細(xì)菌呈紅色。

3.革蘭（Gram）氏染色法

(1)在已干燥、固定好的抹片上，滴加草酸按結(jié)晶紫染色液，染色2一3分鐘，水洗。

(2)加革蘭氏碘液于抹片上媒染1一2分鐘，水洗。

(3)加95%酒精于抹片上脫色，約30秒至1分鐘，水洗。

(4)加稀釋石炭酸復(fù)紅（或沙黃水溶液）復(fù)染50一60秒鐘，水洗。干后鏡檢。結(jié)果是細(xì)菌染成藍(lán)紫色的稱(chēng)為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，染成紅色的稱(chēng)為革蘭氏陰性細(xì)菌。

7.便常規(guī)的細(xì)菌學(xué)檢查方法是什么

大便是由人體消化后形成的廢物，是由食物經(jīng)過(guò)食道、胃、小腸、大腸后產(chǎn)生的代謝廢物。一般而言，大便的顏色、性狀對(duì)疾病的診斷很有幫助，而顯微鏡檢查則對(duì)確定疾病的性質(zhì)較為重要。由于人體的消化系統(tǒng)的復(fù)雜以及寶寶消化道的相對(duì)脆弱，所以，化驗(yàn)大便可以知道消化管道上某一部份的，甚至某特定部份的機(jī)能上或器質(zhì)上的病變，作為判斷寶寶的消化道疾病重要手段。

注意事項(xiàng)是用竹簽或木片采取約蠶豆大一塊新鮮糞便，裝入專(zhuān)門(mén)留取標(biāo)本的紙盒內(nèi)，寫(xiě)上姓名，立即送檢；如大便有膿血時(shí)，應(yīng)留取膿血部分；水樣便要用容器留送；檢查寄生蟲(chóng)時(shí)要在糞便各部分都留一點(diǎn)。

正常人的糞便為黃褐色成形軟便.嬰兒糞便多呈淡黃或者黃色。正常嬰幼兒多為稀糊狀，無(wú)紅細(xì)胞和膿細(xì)胞。

便常規(guī)的細(xì)菌學(xué)檢查：腸道致病菌檢查，主要是靠培養(yǎng)分離與鑒定，但有時(shí)也可以直接涂片、鏡檢。

霍亂弧菌：用懸滴法可觀察其特有形態(tài)與運(yùn)動(dòng)方式。

偽膜性腸炎：涂片、染色后查找葡萄球菌、念珠菌或梭形菌。

腸結(jié)核：涂片、耐酸染色查找結(jié)核分枝桿菌。

念珠菌性腸炎：涂片、鏡檢可找到酵母樣芽生孢子和假菌絲。

某些腹瀉患者：涂片可見(jiàn)大量八疊球菌及人體酵母菌，后者在形態(tài)上易與白細(xì)胞或原蟲(chóng)包囊混淆，可用蒸餾水代替生理鹽水作糞便涂片，此時(shí)人體酵母功很快破裂消失，而白細(xì)胞或原蟲(chóng)包囊則不易破壞。

8.常見(jiàn)的尿細(xì)菌學(xué)檢查方法有哪些

尿細(xì)菌學(xué)檢查對(duì)診斷尿路感染具有重要價(jià)值。

主要有以下兩種 方法。 （1）尿涂片找細(xì)菌。

尿路細(xì)菌感染時(shí)尿中含有大量細(xì)菌，尿液 涂片鏡檢易找到細(xì)菌。每高倍視野細(xì)菌數(shù)少于10個(gè)或未找到，提示 中段尿培養(yǎng)陰性或菌落數(shù)低于10 V ml。

如果細(xì)菌數(shù)為15?30個(gè)/高 倍視野，中段尿培養(yǎng)菌落數(shù)常大于105/ml。 據(jù)中山醫(yī)科大學(xué)葉任高 教授經(jīng)驗(yàn)，其可靠率為90%以上。

并認(rèn)為，即使已開(kāi)始使用抗生素的病例，尿培養(yǎng)陰性，尿沉渣革蘭染色找細(xì)菌仍有可能找到，這樣 就可彌補(bǔ)在應(yīng)用抗生素的情況下尿細(xì)菌培養(yǎng)陰性的缺點(diǎn)。另外，應(yīng) 用革蘭染色涂片找細(xì)菌可以初步確定尿路感染是陽(yáng)性球菌或陰性桿 菌，作為使用抗菌藥物的參考。

（2）尿液細(xì)菌培養(yǎng)。正常人尿內(nèi)有一定數(shù)量的細(xì)菌，尿道口周 圍亦有大量細(xì)菌。

正常人尿道口及陰道存在以下細(xì)菌：表皮葡萄球菌、鏈球菌、枯草桿菌、假白喉棒狀桿菌、變形桿菌、大腸桿菌、乳酸桿菌、卡他布蘭漢氏菌及恥垢分枝桿菌等。外陰沖洗不凈，細(xì)菌?；烊四蛑校?但細(xì)菌數(shù)小于103/ml。

尿細(xì)菌培養(yǎng)的目的主要是運(yùn)用中段尿培養(yǎng)菌 落計(jì)數(shù)的方法以鑒別是否為尿路感染。 若尿菌落數(shù)大于10 V ml為感染，準(zhǔn)確率約80%；細(xì)菌數(shù)小于 103/ml或有多種細(xì)菌生長(zhǎng)，為污染所致，無(wú)臨床意義。

但值得注 意的是球菌，特別是糞球菌及腸球菌繁殖緩慢，其尿菌落數(shù)若為 103 ~ 104/ml之間，即有診斷價(jià)值；細(xì)菌數(shù)在103 ~105/ml者不能排 除感染，考慮是否因應(yīng)用抗生素、清洗消毒劑混入、尿過(guò)頻、細(xì)菌 生長(zhǎng)緩慢等因素所致，必要時(shí)復(fù)查。 不論中段尿，還是導(dǎo)尿，都不可避免前尿道細(xì)菌的污染。

因此， 做細(xì)菌培養(yǎng)而不加含菌量計(jì)數(shù)，結(jié)果很不可靠。但在常規(guī)消毒下做 膀胱穿刺取尿作定性卻很可靠，只要培養(yǎng)出細(xì)菌，不論細(xì)菌數(shù)多少，均認(rèn)為是感染，不會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性。

尿細(xì)菌定量培養(yǎng)結(jié)果很可靠，但 遇到下列情況時(shí)需做膀胱穿刺尿培養(yǎng)：沒(méi)有條件做尿含菌量計(jì)數(shù)的 單位，在診斷上有閑難時(shí)；高度懷疑有尿路感染而尿含菌量卻低； 反復(fù)尿定量細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果均可疑者；要進(jìn)一步確定是否有混合感染 存在；可疑的厭氧菌所致者。 以上情況均考慮做膀胱穿刺尿培養(yǎng)。

方法如下：鼓勵(lì)患者飲水，使膀胱充盈至恥骨聯(lián)合以上，捫及膀胱 后即可穿刺。先剎毛、消毒，用9號(hào)10 cm長(zhǎng)的針頭連接注射器，在 恥骨聯(lián)合上方正中線穿入皮膚，然后猛力穿入膀胱，將尿液收集于 無(wú)菌試管送檢。

拔針后用無(wú)菌紗布覆蓋。 本法是避免污染的最好方法。

缺點(diǎn)是患者有一定的痛苦。 急性泌尿系感染多為單種細(xì)菌，大腸桿菌占60% ~ 80%，余為 金黃色葡萄球菌、變形桿菌、糞腸球菌；慢性感染?；旌掀渌?xì)菌； 綠膿桿菌多在手術(shù)或插管后引起感染。

9.衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查標(biāo)準(zhǔn)

衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查

大腸桿菌不斷隨糞便排出體外，污染周?chē)h(huán)境和水源、食品等。取樣檢查時(shí)，樣品中大腸桿菌越多，表示樣品被糞便污染越嚴(yán)重，也表明樣品中存在腸道致病菌的可能性越大。故應(yīng)對(duì)飲水、食品、飲料進(jìn)行衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查。

細(xì)菌總數(shù)：檢測(cè)每毫升或每克樣品中所含細(xì)菌數(shù)，采用傾注培養(yǎng)計(jì)算。我國(guó)規(guī)定的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是每毫升飲水中細(xì)菌總數(shù)不得超過(guò)100個(gè)。

大腸菌數(shù)指數(shù)：指每立升中大腸菌群數(shù)，采用乳糖發(fā)酵法檢測(cè)。我國(guó)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是每1000ml飲水中不得超過(guò)3個(gè)大腸菌群；瓶裝汽水、果汁等每100ml大腸菌群不得超過(guò)5個(gè)。