藥物有關(guān)物質(zhì)分析方法主要(常用的藥物分析方法)
1.常用的藥物分析方法有哪些
藥品檢驗(yàn)工作的基本程序： 一般為取樣、鑒別、檢查、含量測(cè)定、寫(xiě)出報(bào)告。
取樣： 鑒別：判斷真?zhèn)巍?檢查：稱(chēng)純度檢查，判定藥物優(yōu)劣。
含量測(cè)定：測(cè)定藥物中有效成分的含量。檢驗(yàn)報(bào)告必須明確、肯定、有依據(jù)。
計(jì)量?jī)x器認(rèn)證要求：縣級(jí)以上人民政府計(jì)量行政部門(mén)負(fù)責(zé)進(jìn)行監(jiān)督檢查。符合經(jīng)濟(jì)合理、就地就近。
藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證： 目的是證明采用的方法適合于相應(yīng)的檢測(cè)要求。 驗(yàn)證內(nèi)容：準(zhǔn)確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專(zhuān)屬性、檢測(cè)限、定量限、線(xiàn)性、范圍和耐用性。
一、準(zhǔn)確度： 是指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般以百分回收率表示。至少用9次測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。
[醫(yī)學(xué)教育 網(wǎng) 搜集整理] 二、精密度： 是指在規(guī)定的條件下，同一個(gè)均勻樣品，經(jīng)過(guò)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。
1、重復(fù)性：相同條件下，一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度稱(chēng)為重復(fù)性。至少9次。
2、中間精密度：一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間不同分析人員用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果的精密度。 3、重現(xiàn)性：不同實(shí)驗(yàn)室，不同分析人員測(cè)定結(jié)果的精密度。
分析方法被法定標(biāo)準(zhǔn)采用應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。 三、專(zhuān)屬性：指在其他成分可能存在的情況下，采用的方法能準(zhǔn)確測(cè)定出被測(cè)物的特性，用于復(fù)雜樣品分析時(shí)相互干擾的程度。
鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定方法，圴應(yīng)考察專(zhuān)屬性。 四、檢測(cè)限：指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低量，無(wú)須定量。
用百分?jǐn)?shù)、ppm或ppb表示。 五、定量限：指樣品中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，測(cè)定結(jié)果應(yīng)具一定的精密度和準(zhǔn)確度。
六、線(xiàn)性：系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。 七、范圍：能達(dá)到一定的精密度、準(zhǔn)確度和線(xiàn)性的條件下，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。
八、耐用性：指在一定的測(cè)定條件稍有變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度。 藥物分析的統(tǒng)計(jì)學(xué)知識(shí) 測(cè)量誤差：測(cè)量值和真實(shí)值之差。
絕對(duì)誤差和相對(duì)誤差。真實(shí)值：是有經(jīng)驗(yàn)的人用最可靠的方法對(duì)試樣進(jìn)行多次測(cè)定所得的平均值。
系統(tǒng)誤差：（1）方法誤差 （2）試劑誤差 （3）儀器誤差 （4）操作誤差偶然誤差：不可定誤差或隨機(jī)誤差，由偶然原因引起。可增加平得測(cè)定次數(shù)。
測(cè)量值的準(zhǔn)確度表示測(cè)量的正確性，測(cè)量值的精密度表示測(cè)量的重現(xiàn)性。精密度是表示準(zhǔn)確度的先決條件，只有在消除了系統(tǒng)誤差后，才可用精密度同時(shí)表達(dá)準(zhǔn)確 度。
提高分析準(zhǔn)確度方法： 1、選擇合適的分析方法 2、減少測(cè)量誤差 3、增加平行測(cè)定次數(shù) 4、消除測(cè)量過(guò)程中的系統(tǒng)誤差（校準(zhǔn)儀器、做對(duì)照試驗(yàn)、做回收試驗(yàn)、做空白試驗(yàn)）有效數(shù)字的處理：0.05060g是四位有效數(shù)字。首位是8或9，有效 數(shù)字可多記一位。
ph=8.02是兩位有效數(shù)字。四舍六入五成雙原則。
修約標(biāo)準(zhǔn)偏差或其他表示不確定度時(shí)，修約結(jié)果可使準(zhǔn)確度估計(jì)值變得差一點(diǎn)。s= 2.13——2.2 g檢驗(yàn)法、4d法，>舍去。
藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定的原則和基本內(nèi)容 原則：安全有效，技術(shù)先進(jìn)，經(jīng)濟(jì)合理。 檢驗(yàn)方法：準(zhǔn)確、靈敏、簡(jiǎn)便、快速。
（一）、名稱(chēng)： （二）、性狀： 1、外觀、臭、味和穩(wěn)定性 2、溶解度：一定程度上反映藥品的純度。 3、物理常數(shù) （1）餾程：2000規(guī)定：在標(biāo)準(zhǔn)壓力（101.3kpa）下，按藥典裝置，自開(kāi)始餾出的第五滴算起，至供試品僅剩3-4ml或一定比例的容積餾出時(shí)的溫度范圍。
（2）熔點(diǎn)：系指一種物質(zhì)固體熔化成液體的溫度，熔融同時(shí)分解的溫度，或在熔化時(shí)自初熔至全熔的一段溫度。 （3）凝點(diǎn)：系指一種物質(zhì)由液體凝結(jié)為固體時(shí)，在短時(shí)間內(nèi)停留不變的最高溫度。
（4）比旋度：具光學(xué)異構(gòu)體分子的藥物，旋光性能不同。按干燥品或無(wú)水物計(jì)算。
準(zhǔn)確至0.01 . (5)折光率：光線(xiàn)自一種透明介質(zhì)進(jìn)入另一種透明介質(zhì)時(shí)，兩種介質(zhì)密度不同，光的進(jìn)行速度發(fā)生變化，即發(fā)生折射現(xiàn)象，遵從折射定律。對(duì)于液體藥品，尤其是植物油，檢查藥品的純雜程度，測(cè)定溶液的濃度。
（6）粘度：流體對(duì)流動(dòng)的阻抗能力。共三法，毛細(xì)管內(nèi)徑。
（7）吸收系數(shù)：物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長(zhǎng)。[醫(yī)學(xué)教育網(wǎng) 搜集整 理] （三） 鑒別：用理化方法或生物學(xué)方法來(lái)證明藥品真實(shí)性的方法。
對(duì)已知物。 （四） 雜質(zhì)檢查：有效性，純度要求和安全性。
1、有效性試驗(yàn) 2、酸堿度 3、溶液的澄清度與顏色 4、無(wú)機(jī)陰離子：氯化物和硫酸鹽。 5、有機(jī)雜質(zhì) 6、干燥失重和水分 7、熾灼殘?jiān)褐噶蛩峄曳?，用于考察有機(jī)藥物中混入的無(wú)機(jī)雜質(zhì)。
一般限度為0.1% . 8、金屬離子和重金屬檢查 每日劑量0.5g以上且長(zhǎng)期服用的品種。 9、硒和砷：硒檢查有：醋酸地塞米松、醋酸曲安奈德及醋酸氟輕松。
第一法：古蔡氏法 10、安全性檢查 （五）含量測(cè)定或效價(jià)測(cè)定： 理化方法稱(chēng)含量測(cè)定 生物學(xué)方法或生化方法測(cè)定稱(chēng)效價(jià)測(cè)定。 1、容量分析法：化學(xué)原料藥含量測(cè)定的首選法。
中和法、非水滴定法、銀量法、絡(luò)合法、碘量法、重氮化法。 2、重量法：精密度好準(zhǔn)確度高，不繁瑣，能應(yīng)用容量法時(shí)用。
3、揮發(fā)法、萃取法、沉淀法 4、紫外分光光度法：簡(jiǎn)便、快速。原料藥避免。
5、氣相色譜法：分離效果優(yōu)越， 6、對(duì)含雜質(zhì)和揮。
2.藥物中測(cè)定某物質(zhì)含量的常用方法有那些
方法的驗(yàn)證： 訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的含量測(cè)定法不同于一般質(zhì)量考察的方法，須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的方法學(xué)驗(yàn)證，不同原理的測(cè)定法具有不同的驗(yàn)證內(nèi)容及要求：
(1)容量分析法的驗(yàn)證：①精密度：用原料藥精制品考察方法精密度，平行試驗(yàn)5個(gè)樣本的RSD≤0.2%；②準(zhǔn)確度：以測(cè)定原料精制品（含量>99.5%）的回收率（測(cè)定值與理論值的比值）計(jì)算，應(yīng)在99.7%~100.3%之間（n=5,RSD≤0.1%）；③滴定終點(diǎn)確定的依據(jù)：包括滴定曲線(xiàn)的繪制，如用指示劑法確定終點(diǎn)，應(yīng)用電位法校準(zhǔn)終點(diǎn)顏色，提供指示劑顏色與電位變化情況的對(duì)比結(jié)果；④耐用性：考察測(cè)定條件（供試液穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時(shí)間等）有微小變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度，如測(cè)試條件要求苛刻時(shí)則應(yīng)在方法中注明。
(2)HPLC法的驗(yàn)證：①精密度：RSD≤2%(n=5)；②準(zhǔn)確度：用于制劑時(shí)，要考察輔料的影響，將一定量藥物加到按處方比例配制的輔料中（為標(biāo)示量的80%~120%）制成高、中、低三個(gè)劑量，混合均勻后，每個(gè)劑量取三份樣品，按擬定方法測(cè)定回收率，應(yīng)在98%~102%之間（n=9, RSD≤2%）。③線(xiàn)性范圍：用已知含量的精制品配制一系列濃度的溶液（n=5~7），用濃度C對(duì)峰面積A或峰高h(yuǎn)或被測(cè)物的響應(yīng)值之比進(jìn)行回歸處理，線(xiàn)性方程的相關(guān)系數(shù)r≥0.999，截距應(yīng)趨于零，并提供線(xiàn)性關(guān)系圖；④專(zhuān)屬性：輔料、有關(guān)物質(zhì)或降解產(chǎn)物峰對(duì)主藥峰應(yīng)無(wú)干擾；⑤耐用性：考察測(cè)定條件（供試液穩(wěn)定性、流動(dòng)相組成和pH值、不同品牌或批號(hào)的同類(lèi)色譜柱、柱溫、流速、樣品提取次數(shù)、時(shí)間等）有微小變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度，如測(cè)試條件要求苛刻時(shí)則應(yīng)在方法中注明；⑥靈敏度：作為常量分析法，此項(xiàng)可不作主要要求。
(3)UV法的驗(yàn)證：①精密度：RSD≤1%(n=5)；②準(zhǔn)確度：方法同HPLC法，回收率應(yīng)在98%~102%之間（n=9, RSD≤2%），同時(shí)要求輔料、有關(guān)物質(zhì)或降解產(chǎn)物在測(cè)定波長(zhǎng)處無(wú)吸收。③線(xiàn)性范圍：用已知含量的精制品配制一系列濃度的溶液（n=5~7，吸收度A在0.2~0.7間），用濃度C對(duì)峰面積A或峰高h(yuǎn)或被測(cè)物的響應(yīng)值之比進(jìn)行回歸處理，線(xiàn)性方程的相關(guān)系數(shù)r應(yīng)≥0.999，截距應(yīng)趨于零，并提供線(xiàn)性關(guān)系圖；④耐用性：考察測(cè)定條件（供試液穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時(shí)間、比色法中顯色劑用量、反應(yīng)溫度、時(shí)間、pH值等）有微小變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度，如測(cè)試條件要求苛刻時(shí)則應(yīng)在方法中注明；⑤靈敏度：作為常量分析法，此項(xiàng)可不作主要要求。
吸收度A在0.2~0.8間其線(xiàn)形關(guān)系好，利用標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)后，受測(cè)溶液做適當(dāng)?shù)南♂專(zhuān)蛊湮斩仍?.2~0.8，如果太小或太大，都將影響測(cè)定的準(zhǔn)確性的。
3.藥品檢驗(yàn)時(shí),有哪些常用分析方法
1、重量分析法：重量分析法是藥物分析檢測(cè)中化學(xué)分析的基礎(chǔ)方法，指的是稱(chēng)取一定重量的試樣，用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒈粶y(cè)組分與試樣中其他組分分離后，轉(zhuǎn)化成一定的稱(chēng)量形式，稱(chēng)重，從而求得該組分含量的方法。
2、酸堿滴定法：酸堿滴定法在藥品分析檢測(cè)中的應(yīng)用十分廣泛，是將一種已知其準(zhǔn)確濃度的試劑溶液滴加到被測(cè)物質(zhì)的溶液中，直到化學(xué)反應(yīng)完全時(shí)為止，然后根據(jù)所用試劑溶液的濃度和體積可以求得被測(cè)組分的含量。3、PH值測(cè)定方法：pH值是溶液中氫離子活度的負(fù)對(duì)數(shù)，用來(lái)表示溶液的酸度。
用于pH值測(cè)定的裝置稱(chēng)為pH計(jì)或酸度計(jì)，酸度計(jì)由pH測(cè)量電池和pH指示器兩部分組成。4、光譜技術(shù)：光譜技術(shù)的主要原理就是可以通過(guò)不同的頻率對(duì)其要檢測(cè)的藥物進(jìn)行輻射，在一定范圍中的頻率被一些物質(zhì)接受的時(shí)候就會(huì)出現(xiàn)振動(dòng)以及轉(zhuǎn)動(dòng)的狀況。
5、化學(xué)發(fā)光技術(shù)：在藥物分析檢測(cè)中，化學(xué)發(fā)光法是一種較為常見(jiàn)的技術(shù)方式，其主要就是基于化學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)中相關(guān)檢測(cè)物的濃度以及體系的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度在特定狀況之下呈線(xiàn)性定量關(guān)系的原理，通過(guò)儀器對(duì)整個(gè)體系的化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)，確定待檢測(cè)的實(shí)際含量的方式就是一種痕量分析方法。6、色譜法：色譜法又稱(chēng)為“色譜分析”、“色譜分析法”、“層析法”，是一種分離以及分析的方式與手段。
它主要就是通過(guò)不同的物質(zhì)在不同的相態(tài)之下對(duì)其進(jìn)行有選擇的分配，通過(guò)流動(dòng)相對(duì)固定相中存在的混合物進(jìn)行洗脫操作，而在混合物中存在的不同物質(zhì)會(huì)則會(huì)通過(guò)不同的速度基于固定相進(jìn)行移動(dòng)，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)分離的最終效果。7、電泳法：電泳法是生物技術(shù)及生化藥物分析的重要手段之一，具有靈敏度高、重現(xiàn)性好、檢測(cè)范圍廣、操作簡(jiǎn)便并兼?zhèn)浞蛛x、鑒定、分析等優(yōu)點(diǎn)。
8、DNA擴(kuò)增法：DNA擴(kuò)增技術(shù)屬于PCR技術(shù)，可以把試管中的DNA樣品的片段進(jìn)行拓展，達(dá)到上百萬(wàn)倍左右，可以通過(guò)肉眼直接對(duì)其進(jìn)行觀察。綜上，藥品質(zhì)量的優(yōu)劣關(guān)系著人民的用藥和身體健康，為了保證藥品的質(zhì)量，應(yīng)嚴(yán)格按照藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行藥物分析檢測(cè)，為藥品能否流通上市和提供用藥提供依據(jù)。
