色譜分析的方法(色譜分析有幾種定量方法)

1.色譜分析有幾種定量方法

色譜分析常用的定量方法：歸一化法、內(nèi)標(biāo)法和內(nèi)加（增量）內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法。

1、面積歸一化法優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，當(dāng)操作條件變化時(shí)對(duì)結(jié)果影響較小，宜于分析多組分試樣中各組分的含量。但是試樣中所有組分必須全部出峰，因此，此法在使用中受到一定限制。

2、外標(biāo)法是用純物質(zhì)配成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液（或直接購(gòu)買不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液）分別取一定體積，注入色譜儀，根據(jù)峰面積和濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線。在分析未知樣時(shí)按與標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的操作條件和方法，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出所需組分的濃度（現(xiàn)在在工作站上直接就能求出濃度）。

此法要求進(jìn)樣準(zhǔn)確，操作條件穩(wěn)定，分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線條件必須一致。 3、內(nèi)標(biāo)法是試樣中所有組分不能全部出峰或只要求測(cè)定試樣中某個(gè)或某幾個(gè)組分時(shí)，可采用此法。

內(nèi)標(biāo)法是在準(zhǔn)確稱取一定量的試樣中，加入一定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（內(nèi)標(biāo)物），根據(jù)內(nèi)標(biāo)物和試樣的質(zhì)量以及色譜圖上的相應(yīng)峰面積，計(jì)算待測(cè)組分的含量。內(nèi)標(biāo)法的關(guān)鍵是選擇合適的內(nèi)標(biāo)物，內(nèi)標(biāo)物應(yīng)是試樣中不存在的純物質(zhì)，物質(zhì)與被測(cè)物質(zhì)相近，能溶于樣品中，但不能于樣品發(fā)生反應(yīng)。

此法比較費(fèi)事，一般不使用于快速分析。

2.常用的層析分析方法有哪些

在分離分析特別是蛋白質(zhì)分離分析中，層析是相當(dāng)重要、且相當(dāng)常見(jiàn)的一種技術(shù)，其原理較為復(fù)雜，對(duì)人員的要求相對(duì)較高，這里只能做一個(gè)相對(duì)簡(jiǎn)單的介紹。

一、吸附層析 1、吸附柱層析 吸附柱層析是以固體吸附劑為固定相，以有機(jī)溶劑或緩沖液為流動(dòng)相構(gòu)成柱的一種層析方法。 2、薄層層析 薄層層析是以涂布于玻板或滌綸片等載體上的基質(zhì)為固定相，以液體為流動(dòng)相的一種層析方法。

這種層析方法是把吸附劑等物質(zhì)涂布于載體上形成薄層，然后按紙層析操作進(jìn)行展層。 3、聚酰胺薄膜層析 聚酰胺對(duì)極性物質(zhì)的吸附作用是由于它能和被分離物之間形成氫鍵。

這種氫鍵的強(qiáng)弱就決定了被分離物與聚酰胺薄膜之間吸附能力的大小。層析時(shí)，展層劑與被分離物在聚酰胺膜表面競(jìng)爭(zhēng)形成氫鍵。

因此選擇適當(dāng)?shù)恼箤觿┦狗蛛x在聚酰胺膜表面發(fā)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的連續(xù)過(guò)程，就能導(dǎo)致分離物質(zhì)達(dá)到分離目的。 常用的層析分析方法，登錄生物幫看看。

/zt/focus/ 生物熱點(diǎn)研究，生物學(xué)熱點(diǎn)問(wèn)題。

3.色譜法有哪四種常見(jiàn)的方法

高效液相色譜法處理，以指示的 ①的高壓力：更大的阻力，流動(dòng)的液體通過(guò)高壓迅速通過(guò)該柱通過(guò)柱的流動(dòng)相，液體載體。

②高效：分離效率高。選擇一個(gè)固定相和流動(dòng)相，以便達(dá)到最佳的分離效果，并且是工業(yè)精餾塔和氣相色譜分離性能高出許多倍。

③高靈敏度：紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，μL級(jí)的注射量。的 ④由高性能液相色譜法分析，特別是高沸點(diǎn)的分離和分析，大分子，強(qiáng)極性，熱穩(wěn)定性差的化合物，可用于廣泛的應(yīng)用范圍：70%以上的有機(jī)化合物的，示出的優(yōu)點(diǎn)。

⑤分析速度快，載液的流速快：速度更快，更經(jīng)典的液相色譜通常在15至30分鐘的樣品分析，部分樣品甚至在五分鐘內(nèi)完成，一般不超過(guò)1小時(shí)。 此外，高效液相層析柱可？？反復(fù)使用，和樣品不被破壞，易回收等優(yōu)點(diǎn)，但也有缺點(diǎn)，與氣相色譜法相比，有自己的長(zhǎng)處和優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)。

的缺點(diǎn)的高性能液相色譜法“列效果。從噴射器到檢測(cè)器上，在除了比支柱死空間（噴射器，柱接頭，連接管和檢測(cè)器單元等）的任何其他的類型，如果流動(dòng)相流量的變化在任何要被分離和滯留的物質(zhì)的擴(kuò)散會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)大的峰，柱效降低顯著高性能液相色譜檢測(cè)器的靈敏度是小于在氣相色譜儀中。

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4.氣相色譜定量分析方法有哪些

氣相色譜定量檢測(cè)一般就兩種，一個(gè)是外標(biāo)法，一個(gè)是內(nèi)標(biāo)法，對(duì)于沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的，就只能靠面積歸一法粗略定量。

外標(biāo)和內(nèi)標(biāo)百度上有很多介紹，這里跟你講一下對(duì)于沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的中間體該怎么通過(guò)氣相色譜定量。

1.首先，要通過(guò)重結(jié)晶、過(guò)柱子、吸附等等方法先獲得盡可能純的產(chǎn)物；

2.然后烘干至恒重，注意要把結(jié)晶水也烘掉；

3.烘干以后，根據(jù)產(chǎn)物合成、純化過(guò)程投加的各種物料，用氣相色譜測(cè)殘留溶劑，盡可能測(cè)全、測(cè)準(zhǔn)；

4.測(cè)煅燒殘?jiān)?00℃在馬弗爐里燒半個(gè)小時(shí)以上，測(cè)一下煅燒殘?jiān)@些可能是夾雜在產(chǎn)物中的無(wú)機(jī)鹽；

5.測(cè)水分，用溶劑把產(chǎn)物溶解掉，用微量水分測(cè)定方法測(cè)定產(chǎn)物中的水分，注意要扣除溶劑的空白值；

6.氣相色譜檢測(cè)產(chǎn)物：先通過(guò)調(diào)節(jié)分流比、汽化溫度、柱溫等，確認(rèn)產(chǎn)物峰上沒(méi)有毛刺或者坎肩峰；調(diào)檢測(cè)條件，選一個(gè)峰形最好的條件，面積歸一法定量；

7.計(jì)算：先扣除前面檢測(cè)出來(lái)的殘留溶劑、煅燒殘?jiān)退值暮浚俪艘悦娣e歸一法的面積百分含量。

這樣相對(duì)來(lái)說(shuō)是比較準(zhǔn)的定量方法了，面積百分含量越高的且其他殘留越低的，定量越準(zhǔn)。