常用的脫氣方法(HPLC的流動相常見的脫氣方法)
1.HPLC的流動相常見的脫氣方法有哪些
液相色譜流動相脫氣使用較多的方法大概有四種：氦氣脫氣、真空脫氣、超聲波脫氣、加熱脫氣。
1.氦氣脫氣：氦氣脫氣是很有效的脫氣方法。氦氣緩緩的通過流動相趕去溶入的空氣，如果使用得當(dāng)，在10min內(nèi)可除去80%~90%的溶入氣體。由于氦氣在流動相中的溶解度極低，所以用氦氣脫氣保護的流動相可以認(rèn)為是一個無氣體溶解體系。
2.真空脫氣：也是比較常用的脫氣方法。貯液器被抽成部分真空，溶入的氣體蒸發(fā)形成氣泡溢出，其效果僅次于氦氣脫氣。
3.超聲波脫氣： 將配制好的流動相連容器放入超聲水槽中脫氣10-20min。這種方法比較簡便，又基本上能滿足日常分析操作的要求，所以，目前仍廣泛采用。這種方法只能除去30%的溶解氣體，有時還會引起氣體溶解度的增加。對氧敏感的檢測器不宜用此法。
4.加熱回流脫氣：該方法雖然效果很好，但是適用范圍較窄。對于有機溶劑或混合流動相不適合用此法，因為揮發(fā)性組分會損失掉，改變流動相的組成。
現(xiàn)在液相色譜大多都是多元系統(tǒng)，可以同時輸送幾種不同的流動相。但需要注意的是， 有些流動相不同組分混合時會有氣體產(chǎn)生，對于這種流動相應(yīng)改系統(tǒng)內(nèi)混合為系統(tǒng)外預(yù)混合。
2.高效液相色譜法使用流動相前為什么要脫氣
HPLC所用流動相必須預(yù)先脫氣，否則容易在系統(tǒng)內(nèi)逸出氣泡，影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率，影響檢測器的靈敏度、基線穩(wěn)定性，甚至使無法檢測。
噪聲增大，基線不穩(wěn)，突然跳動。此外，溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應(yīng)。溶解氣體還會引起溶劑pH的變化，對分離或分析結(jié)果帶來誤差。
常用的脫氣方法有：加熱煮沸、抽真空、超聲、吹氦等。
高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現(xiàn)對試樣的分析。
擴展資料：
液相色譜和質(zhì)譜連接，可以增加額外的分析能力，能夠準(zhǔn)確鑒定和定量像細胞和組織裂解液，血液，血漿，尿液和口腔液等復(fù)雜樣品基質(zhì)中的微量化合物
流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應(yīng)互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個明顯的分界面。當(dāng)試樣進入色譜柱，溶質(zhì)在兩相間進行分配。達到平衡時，服從于高效液相色譜計算公式。
式中，cs—溶質(zhì)在固定相中濃度；cm—溶質(zhì)在流動相中的濃度； Vs—固定相的體積；Vm—流動相的體積。LLPC與GPC有相似之處，即分離的順序取決于K,K大的組分保留值大；但也有不同之處，GPC中，流動相對K影響不大，LLPC流動相對K影響較大。
參考資料來源：搜狗百科——高效液相色譜
3.果蔬汁加工脫氣的方法有哪些
脫氣的方法①真空脫氣：原理是氣體在液體內(nèi)的溶解度與該氣體在液面上的分壓成正比，果蔬汁進行真空脫氣時，液面上的壓力逐漸降 低，溶解在果蔬汁中的氣體不斷逸出，直至總壓降到果蔬汁的蒸 汽壓時，已達平衡狀態(tài)，此時幾乎所有氣體已被排出。
真空脫氣 設(shè)備由真空泵、脫氣罐和螺桿泵組成。真空脫氣機的噴頭有噴霧 式、離心式和薄膜式3種。
②置換法：吸附的氣體通過氮氣、二氧化碳等氣體的置換被 排除。③化學(xué)脫氣法：利用一些抗氧化劑或需氧的酶類作為脫氣 劑，效果甚好。
如對果蔬汁加入抗壞血酸即可起脫氣作用，但應(yīng) 注意此藥品不適合含花色苷豐富的果蔬汁中應(yīng)用。在果蔬汁中加 人葡萄糖氧化酶也可起良好的脫氣作用。
4.什么是脫氣
流動相使用前為什么要脫氣
流動相使用前必須進行脫氣處理 ，以除去其中溶解的氣體（如O2），以防止在洗脫過程中當(dāng)流動相由色譜柱流至檢測器時，因壓力降低而產(chǎn)生氣泡。氣泡會增加基線的噪音，造成靈敏度下降，甚至無法分析。溶解的氧氣還會導(dǎo)致樣品中某些組份被氧化，柱中固定相發(fā)生降解而改變柱的分離性能。若用FLD，可能會造成熒光猝滅。
常用的脫氣方法比較：
氦氣脫氣法：利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好，但成本高。
加熱回流法：效果較好，但操作復(fù)雜，且有毒性揮發(fā)污染。
抽真空脫氣法：易抽走有機相。
超聲脫氣法：流動相放在超聲波容器中，用超聲波振蕩10-15min，此法效果最差。
在線真空脫氣法：Agilent1100LC真空脫機利用膜滲透技術(shù)， 在線脫氣，智能控制，無需額外操作，成本低，脫氣效果明顯優(yōu)于以上幾種方法，并適用于多元溶劑體系。
